干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 请教MSC成骨分化时细胞凋亡了，原因会是？ [打印本页]

作者: awangling 时间: 2012-6-24 23:26 标题: 请教MSC成骨分化时细胞凋亡了，原因会是？

小弟的软骨MSC做成骨甩软骨分时，总是进行2周时。细胞全部凋亡了，剩下棉絮状物质，可以肯定不会是诱导生成的东西吧。ALCIAN染色什么都没有，请问是有这方面经验的介绍会是什么原因啊。用的GIBIO的合成的诱导液。没有加其它成分。

作者: 漂泊的风 时间: 2012-6-25 08:29

估计是你那诱导液的问题，对细胞的刺激强度太大了，细胞忍受不住导致凋亡。可以改变一下诱导液的浓度看看。

作者: liluli0715 时间: 2012-6-25 09:13

我们用的也是gibico诱导培养液，很容易将MSC诱导成骨和脂肪细胞，效果很好。我们是在孔板里做的，会出现少量棉絮状物质主要是孔板里部分地方细胞密度大，此外你的细胞没染上颜色，跟你配置的茜素红浓度、pH、是否过滤也有关系。

作者: amberma 时间: 2012-6-25 10:35

回复 liluli0715 的帖子+ a+ D6 u: ]8 V' O

请教下高手成脂分化大概几天看到的表型变化，有其他需要注意的地方吗？能不能分享下诱导液配方~ 谢谢啦~~~~~

作者: liluli0715 时间: 2012-6-26 11:07

我们做成骨、脂肪分化都用的是两星期，有很多文献上成骨是三个星期，你买的是gibico分化试剂盒是吧？你就按照说明书上来，就没问题。关键是你在孔板里接种细胞要均匀，然后是油红O要过滤，临用前3:2稀释后再过滤，效果很好

作者: awangling 时间: 2012-6-27 22:04

光镜下，可以肯定培养皿里面没有看到细胞了，看到提细胞干枯了似的，接着就碎裂了，GIBIO合成液，不用自己加什么成分啊，经验丰富的师兄，我可否加地塞米松进去？？

作者: 634996425 时间: 2012-7-4 12:46

请问您们在诱导第七天和第14天的成脂细胞是什么样的，可以发一张图吗，我在诱导中怎么培养基上总会飘一层像脂肪的棉花团，如果是成脂细胞破裂了请问如何维持

作者: 细胞海洋 时间: 2012-7-5 00:50

回复 634996425 的帖子" C- k0 ]! a8 Y% r& ?/ m! _6 @- K
" ~+ B5 M* I# e1 }2 Z
建议你发新帖提问并且上传图片

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)