干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 关于人脐带间充质干细胞培养基的问题 [打印本页]

作者: 孙帅帅    时间: 2013-2-17 16:54     标题: 关于人脐带间充质干细胞培养基的问题

人脐带间充质干细胞原代培养和传代培养用什么培养基比较合适,用1640还是DMEM/F12?
作者: sunshine0826    时间: 2013-2-17 22:02

我们用a-MEM(GIBCO)和10%特级胎牛血清(元亨)培养的很好~可以参考下
作者: 老姜    时间: 2013-2-18 02:09

1640一般多用于淋巴细胞培养,脐带间充质用低糖的DMEM也不错,关键是血清,质量越好细胞生长的越好!
作者: damaoshu    时间: 2013-2-18 02:24

We also used RMPI 1640 as breast cancer cell lines. Higher FBS(fetal bovine serum) , faster cell growth speed.
作者: xuehu20    时间: 2013-2-18 08:42

当然是DMEM/F12了,1640是养淋巴细胞的/ h4 R8 X$ `. _/ _7 }' t2 ^$ V6 J

作者: 山风    时间: 2013-2-18 08:51

用α-MEN加10%的胎牛血清(最好进口)吧,这个培养出来的脐带间充质干细胞状态等都比较好,价格还相对实惠;如果不考虑培养基的价格也可以选择无血清培养基Lonza等好多都人专门用于干细胞培养的无血清培养基。
作者: newjack920    时间: 2013-2-18 09:12

DMEM/F12
作者: 天天天雨雨    时间: 2013-2-18 14:28

用a-MEM养的不错,流式检测结果也很好,细胞状态好,数也很多
作者: 孙帅帅    时间: 2013-2-18 16:32

回复 老姜 的帖子5 e) P( q2 x5 c: a5 W% r

1 k; D8 A4 U- d- m还需要补加谷氨酰胺和双抗吗?还有还要加一下细胞因子吗?
作者: 孙帅帅    时间: 2013-2-18 16:33

回复 山风 的帖子, [! u; r7 x8 w5 j
, M1 M! h: \' [8 J, U1 c( w0 V
谢谢~~    目前还没有用过无血清培养基
作者: 孙帅帅    时间: 2013-2-18 16:37

回复 sunshine0826 的帖子
. L/ }" g  p: i9 x8 b6 W2 L0 b; P
9 e8 A( h  Y6 w1 N7 T+ Na-MEM和DMEM有什么不一样的地方?用DMEM好还是DMEM/F12好呢?
作者: 老姜    时间: 2013-2-18 21:36

回复 孙帅帅 的帖子8 u- U% r+ w+ D4 L

6 q2 a, E- H& C! F专业书籍上写道:谷氨酰胺作为能源和碳源被培养中的细胞利用,不稳定,易降解,因此1或2周加一次;现有其替代物谷氨酰胺二肽:L—glutamine的衍生物,稳定性增高,培养液中只需加一次。
! _8 {& h- T2 r' j看样子你是新手,建议加双抗。不需另加细胞因子,细胞一样长的好,除非课题研究需要。
作者: sunshine0826    时间: 2013-2-18 23:24

本帖最后由 sunshine0826 于 2013-2-18 23:25 编辑
7 h* L/ Z+ C) E$ b0 U( P: I1 u5 j4 V
回复 孙帅帅 的帖子8 e6 B' u5 N6 m- @

7 E3 a  `7 J& X0 k, Y[attach]49623[/attach]- m8 O# j( v6 u1 }1 I3 j
可以了解下
作者: 山风    时间: 2013-2-19 09:11

回复 孙帅帅 的帖子
7 w0 @+ w/ k% U! b9 A# S- f0 x9 t
6 `% Q" n4 f$ P( {谷氨酰胺可以加,对细胞生长有一定的好处,双抗如果实验室条件比较好或者操作比较认真的话没必要加,细胞因子暂时没有加过,培养的细胞也比较理想!
作者: 孙帅帅    时间: 2013-2-19 13:18

回复 老姜 的帖子
; J0 G- x8 y  A- `
* B2 [: |  P" {% V& ^哦哦  谢谢你   
作者: 孙帅帅    时间: 2013-2-19 13:24

回复 sunshine0826 的帖子/ w  i' i4 o% A& m

! d. Y  t5 f5 d' D谢谢
作者: 孙帅帅    时间: 2013-2-19 13:36

回复 孙帅帅 的帖子( Y; f+ d" k, M8 n, e7 V

; W* p4 |! M6 d% U$ ga-MEM和DMEM有什么不一样的地方吗?谢谢
作者: 孙帅帅    时间: 2013-2-19 13:36

回复 山风 的帖子+ D% h( G' _* {! O# G& E% e1 ^1 a

" \' T2 X7 C4 y1 l" i$ Y* ]0 La-MEM和DMEM有什么不一样的地方吗?
作者: 老姜    时间: 2013-2-20 23:21

回复 孙帅帅 的帖子
3 |; ]( ^; l5 R5 `: Z9 ~
/ G8 A; _' b4 o5 _MEM是其内的必需氨基酸和维生素调整的接近细胞质内的含量水平,而制成了最低必需培养液。
; N7 J) a% F- y& ~; I* O* ^DMEM是在MEM的基础上增加了各成分的用量,又分为高糖型和低糖型。高糖型适用于生长较快,附着性差的肿瘤细胞,转化细胞。
作者: xingyuncao    时间: 2013-4-9 10:47

低糖DMEM+10%FBS,细胞长得不错,不需要加细胞因子,血清最好用进口的
作者: 冯浩轩    时间: 2014-1-24 16:44

我们使用的是无血清培养基有成品专卖的 我们用的就是那个  细胞维持增殖很好很稳定,培养的细胞3代和20代流式结果基本一样。
作者: wf78365421    时间: 2014-1-27 16:27

DMEM/F12比1640好点。
作者: weijunning    时间: 2014-1-27 16:54

回复 老姜 的帖子% x5 {# I, f  l6 d. }+ t8 j7 h
& U9 [0 K6 D6 p0 Q* m
你们培养时从原代就不加细胞因子吗?
作者: zhangjieyctc    时间: 2014-2-8 09:14

回复 冯浩轩 的帖子3 N- s9 V' K& p, I9 r) ~; C  D
- ?/ \7 ^3 @8 ?8 Q% t9 R( J2 [
请问何种培养基,名字叫什么。我最近也在做脐带间充质干细胞,可否参考下
作者: 冯浩轩    时间: 2014-2-10 17:24

回复 zhangjieyctc 的帖子
4 v5 z8 t7 ^0 N2 F
9 h5 }# I' C7 F1 ^! N我们称之为MD培养基
作者: swtarron    时间: 2014-2-14 15:03

看细胞是用来干什么的,将来如果要是用于治疗的话,还是应该用无血清的培养基,有血清的培养基培养的细胞按规定是不能用于治疗的。当然如果不是用于治疗的话,可以用DMEM/F12来培养,DMEM/F12培养出来的细胞的标志要比无血清培养的细胞要好一些。
作者: lizzy_81    时间: 2014-2-14 15:49

1640是养悬浮细胞的。MSC最好用低糖的DMEM
作者: Amanda121201    时间: 2014-2-17 10:19

DMED/F12比较好 双抗我们都是会加进去的 除此之外 生长因子一般不需要加的 除非你要定向诱导分化
作者: 沙漠狐o0    时间: 2014-4-8 15:02

回复 山风 的帖子
' S: Q: I5 ~, @# d3 M4 r0 l) d2 `% A, ?2 ~8 z- {' l
问下是Lonza哪款无血清培养基,血清替代物也是Lonza的么?




欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/) Powered by Discuz! X1.5