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标题: 请教大家：分选后细胞活力的问题 [打印本页]

作者: 570505 时间: 2013-3-24 13:26 标题: 请教大家：分选后细胞活力的问题

请教大家：用流式分选之后，细胞数量少了非常多，而且细胞活力较差，大家有什么方法克服吗？

作者: ciweiyuan 时间: 2013-3-25 09:06

我所能想到的就是尽可能的提高阳性率，增加细胞的贴壁率

作者: guen 时间: 2013-3-25 09:59

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如果阳性率你不能提高的话，我个人觉得可以提高分选时的细胞量，在一个就是减少操作时间。

作者: levell 时间: 2013-3-25 11:33

有些是分选过程中细节的注意吧，收集细胞的流式管加入培养基后，慢慢倾斜旋转，将管口用培养基浸湿，因为有很多分选后的细胞打到管口，操作尽快进行吧

作者: zhangweihwz 时间: 2013-3-25 23:25

流式分选时，细胞是带电的，所以会影响细胞活力。消化后的细胞悬液一直放在冰上，降低细胞的新陈代谢，会减少细胞细胞分选后的不佳状态。

作者: gact 时间: 2013-3-29 08:46

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谢谢，学习了。。

作者: 我爱火热的冬天 时间: 2013-3-31 17:56

要想用流失分选，细胞活性的降低是必然的，要再实验过程中注意每个细节，减少细胞的损失量，同时操作要快，作用过程要适时恰当，这是我的理解。

作者: yxhss 时间: 2013-5-21 22:10

我是采用磁珠分选的，分选后阳性率可以，但死细胞较多，想问各位：1.分选说明书上说细胞离心采用300g,10min.大约2000rpm,我操作都在冰上，死细胞多是否是离心力太大，2.分选出来的细胞较多，一个实验又用不完，想问大家怎么养，以便第二天再做其他实验，是用原来的肿瘤细胞培养基，还是用无血清的肿瘤干细胞培养基，如果是后者，那就是用形成球状体的培养基，因此要用低粘附培养板。

作者: 细胞海洋 时间: 2013-5-22 00:13

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作者: jojo1988509 时间: 2014-1-9 16:24

1.拿去分选的细胞状态要好，尽量多。2.分选前和分选后把流式管放在冰上。3.分选动作快。

作者: superlamp 时间: 2014-3-29 22:24

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我也正想用磁珠呢，请问你是直接分选的还是先富集在分选的？什么marker？效率有多高？

作者: 小飞雪2300 时间: 2017-6-16 23:07

分选会流失很多细胞，细胞本身的状态就是分选的关键因素，分选对细胞的损伤其实蛮大，建议尽量降低分选速度缩短分选时间。

作者: 一枝独秀 时间: 2017-6-27 11:43

细胞消化环节要注意，还有就是细胞缓冲液中要有保护细胞活性的成分，全称至冰上低温操作4 S! [/ v& I" g. P

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