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标题: 关于CIk包被的问题。 [打印本页]

作者: 111huazai111 时间: 2014-3-5 10:20 标题: 关于CIk包被的问题。

CD3和RN 联合包被的浓度大家可以讨论下啊？

作者: 大海之家 时间: 2014-3-5 11:26

RN的浓度我觉得可以降低些

作者: 孙帅帅 时间: 2014-3-5 13:11

请问 RN是什么东东呀

作者: weijunning 时间: 2014-3-5 15:40

我们是将成品RN试剂分装成100ul/支的量，第一次包被时，选用1支，加入5ml1640培养基中，铺入T175培养瓶中避光包被。一般一支RN试剂可以重复使用三次都没有问题。

作者: lidd14 时间: 2014-3-6 09:21

不用RN，只用CD3包被就可以，CD3单克隆抗体用D-PBD稀释成100ug/ml浓储液，再1:10稀释成工作液。每个T175瓶中，加入10ml工作液，均匀覆盖其瓶底，盖好瓶盖，用封口膜将瓶口封上。在室温下，放置过夜，再移入4°C冰柜保存。一般包被一个月后才可以使用。

作者: 大海之家 时间: 2014-3-6 10:18

回复 lidd14 的帖子1 w8 i/ E' J/ A9 K0 S4 j
( V5 q4 T I e$ p* u% Y
工作浓度下一个月时间单抗的活性会降低许多的，过夜就行了

作者: aochongyu 时间: 2014-3-11 11:03

我感觉包被后4、5个小时以上就可以了，不用一定过夜

作者: aochongyu 时间: 2014-3-11 11:06

回复 111huazai111 的帖子

RN是什么？？？

作者: zhrt 时间: 2014-3-31 16:03

回复 weijunning 的帖子7 v4 V/ d! V/ C, }

使用三次间隔的时间是多久，每次使用需不需要再添加因子

作者: zhrt 时间: 2014-3-31 16:05

包被后放37度培养箱3h就ok了。RN浓度你们都用多少？初次加培养液的量为多少呢

作者: 草胞 时间: 2014-4-2 09:49

RN是重组人纤维连接蛋白(RetroNectin ， RN) 吧

作者: 筱筠 时间: 2014-4-12 08:41

15-25ug就可以吧$ q, m- J( x) l6 p1 Q7 v! l2 G

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