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标题: CAR-T技术原理 [打印本页]

作者: aochongyu 时间: 2014-5-30 09:01 标题: CAR-T技术原理

嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）是将能识别某种肿瘤抗原的抗体的抗原结合部与CD3-ζ链或FcεRIγ的胞内部分在体外偶联为一个嵌合蛋白，通过基因转导的方法转染患者的T细胞，使其表达嵌合抗原受体(CAR)。患者的T细胞被“重编码”后，生成大量肿瘤特异性的CAR-T细胞。（摘录）了解的大神讨论一下！[attach]61779[/attach]

作者: scottist 时间: 2014-5-30 09:29

你说的应该是第一代CART技术，第二代除添加T细胞刺激因子CD3外，还串联添加了共刺激因子如CD28、OX40、4-1BB，刺激T细胞增殖，第三代在一个共刺激因子的基础上再串联一个共刺激因子，即两个共刺激因子，更加有效地促进T细胞的活化增殖。

作者: suzuki 时间: 2014-5-30 10:59

希望了解目前CART治疗癌症比较成熟的病种是哪几种？

作者: liyan 时间: 2014-5-30 12:26

本帖最后由细胞海洋于 2015-9-28 16:22 编辑
9 y* A" `$ e W
综述：
- Z& v* n+ a/ v& U% z
E& A2 i k c

[attach]72262[/attach]

作者: aochongyu 时间: 2014-5-30 13:23

回复 liyan 的帖子
# e- \" v( g5 t. J) h! ^
谢谢

作者: aochongyu 时间: 2014-5-30 13:23

回复 scottist 的帖子& J! J+ c: |# F% }; Y

哦。学习

作者: chenjxcd 时间: 2014-5-30 15:01

回复 liyan 的帖子- |9 t9 E1 H% G1 n% s( j
/ {; `" m7 l9 ?& f7 I% @
谢谢

作者: gengtongyu521 时间: 2014-6-2 16:33

CAR-T技术目前成熟了吗？应用于临床了吗？美国FDA已经获得了临床试验的许可，但是国内呢？貌似有副作用，这些问题解决了吗？

作者: lyj-0017 时间: 2014-6-4 14:50

回复 gengtongyu521 的帖子
3 @$ O& ?3 m  k4 t% L6 S* |- H
   一代、二代CAR-T技术从理论上来讲是已经相对成熟了，欧美也已经应用于临床试验，副作用的问题，如果只是常规的反应较小的副作用，应该是没什么大问题，大一点的副作用，如细胞因子风暴，目前应该是尚无很好的解决办法。
   由于CAR-T技术涉及到转基因技术，西方国家是可以应用于临床的，但中国卫计委目前还不允许转基因技术应用于人体，即使目前国内某些医院或公司已经在开展该技术，基本上都是违规的（细胞治疗违规+转基因技术违规）。

作者: Tim 时间: 2014-6-4 15:18

回复 scottist 的帖子
h. X$ D7 b( X- q
可以详细点吗？大神！

作者: scottist 时间: 2014-6-5 10:50

回复 Tim 的帖子
) q$ d# F: z5 o9 ?* @
http://www.stemcell8.cn/forum-vi ... F6%C3%E2%D2%DF.html，这个帖子讲的比较详细，请参考。

作者: aspirin713 时间: 2014-6-6 13:50

请问CAR-T技术目前在国内是什么情况？感觉众说纷纭

作者: 细胞海洋 时间: 2014-6-6 14:11

回复 aspirin713 的帖子; K. M" Z1 U* f; [

建议你发新帖提问

作者: chang-514 时间: 2014-8-5 20:47

学习，学习。

作者: wizard2351 时间: 2014-8-14 16:57

嵌合抗原受体的转染技术就存在着问题，多数是采取逆转录病毒转染的，谁能保证这些病毒进入体内不会引起副作用？不过CAR-T的靶向性确实是很好的，这种毕竟是针对某一种的肿瘤抗原做的嵌合抗原受体，如果克服一些问题，以后的前景还是不错的。

作者: 刘彩云 时间: 2014-10-4 20:11

同样想了解更多一点，比如培养方法等。

作者: wizard2352 时间: 2014-10-22 15:26

回复 lyj-0017 的帖子5 G; W8 p3 G P. @& f+ Q7 ]
. a3 ~% t4 _2 v
您好！您说的违规操作，有没有法规的依据，我没找到，可否给我一个链接，我想参考一下谢谢！

作者: lyj-0017 时间: 2014-10-22 15:37

回复 wizard2352 的帖子

首先，免疫细胞治疗方面，目前没有任何一家通过卫计委审核的（当然，这不是我们的问题，是主管行政部门不作为）；基因治疗方面，你可以查查国家第三类医疗技术的准入情况。

作者: ciweiyuan 时间: 2014-12-16 11:37

回复 suzuki 的帖子3 h: P% K- }' d7 b& g5 N5 S
/ [0 k$ N) B" j* ^
我知道的有b淋巴细胞瘤

作者: wendy11243723 时间: 2015-5-26 09:58

刚刚入门，学习中。。。。

作者: 15063363804 时间: 2016-1-3 15:11

作者: 315997864 时间: 2016-5-11 16:33

CAR-T细胞技术已经发展出3代，第1代CAR在胞内只有１个Ｔ细胞CD3ζ受体的信号区；在此基础上第2代增加了1个共刺激分子信号；第3代增加了2个共刺激分子信号。这些改进是基于一系列体
外和体内的实验和临床探索。目前，用于临床治疗研究的主要为第2代CART细胞技术，其中用来携带CAR的载体主要来源于逆转录病毒和慢病毒

作者: wang255425 时间: 2016-6-6 11:40

目前已经在开发的第四代CAR-T技术，包括整合表达免疫因子、整合共刺激因子配体等。

作者: ET生物人 时间: 2016-6-6 16:44

回复 lyj-0017 的帖子9 j# w' D/ a; G. A

西方国家的公司目前是应用于临床研究，国内的医院和公司也有啊

作者: 842195369 时间: 2016-6-7 13:00

CAR-T治疗--肿瘤靶向免疫治疗
• CAR-T，全称 Chimeric Antigen Receptor T-Cell Immunotherapy，即嵌合抗原受体T细胞免疫疗法。
• 通过将识别肿瘤相关抗原的抗体片段scFv和CD3胞内信号域 ITAM在体外进行基因重组，生成重组质粒，再在体外( \6 ?( c! W6 p& q0 q9 o L' b5 k
转染到患者的T细胞，使患者T细胞表达能结合肿瘤抗原的受体。转染后经过纯化和大规模扩增后的T细胞，也即8 k- s; ~# f7 z. N
CAR-T细胞。CAR-T技术利用病毒载体将 CAR稳定表达在T细胞中，经过活化扩增，进入体内后能选择性识别并杀死肿瘤细胞。6 b7 ]0 p* f0 U& Z" [
• 可以特异性地识别肿瘤相关抗原，使效应T细胞的靶向性、杀伤活性和持久性较常规应用的免疫细胞大幅提高，并可克服肿瘤局部免疫抑- A1 p z8 B' M
制微环境，从而打破宿主免疫耐受状态，杀灭肿瘤细胞。
肿瘤相关抗原：tumor-associated antigen，TAA，是指一些肿瘤细胞表面糖蛋白或糖脂成分，它们在正常细胞上有微量表达，但在肿瘤细胞表达明显增高。
ITAM：immuno receptor tyrosine-based activation motifs,免疫受体酪氨酸基序活化信号域

作者: 842195369 时间: 2016-6-7 13:05

CAR-T重组质粒的构建
1. 选择载体：腺病毒、慢病毒或其它能高效转染T细胞、表达嵌合抗原受体的载体。
2. 选取靶点：即肿瘤细胞特异性或相关的膜表面蛋白，如B淋巴细胞的CD19。
3. 获取特异性好、亲和力强的抗体的基因序列：这是CAR-T技术的关键和难点所在，
因为抗体的产生是免疫原作用下基因重排的表达产物，抗体基因编码序列在
NCBI的数据库是查不到的，而且在目前阶段是不可预测的。动物来源的抗体片
段在人体内可能会诱导针对此抗体片段的抗体，削弱长期的治疗效果，所以，往9 W8 ]8 y6 L( r9 Q5 \) k
往需要把动物来源的优质抗体人源化。
4. 构建重组质粒，感染T细胞：除抗体片段的编码基因，还要加入跨膜区、CD3胞 f2 h- C! t% z
内区、共同刺激因子以及白介素的编码序列。也是关键技术。
5. 体外验证：嵌合抗原受体是否正确表达于T细胞表面；CAR-T细胞能否有效扩
增；CAR-T细胞是否能识别病人的肿瘤细胞并溶解肿瘤细胞；释放细胞因子的种 b# `2 I* ]* q1 T8 [
类和数量，等。. I4 ~3 S: T) t3 t* G& C
体内验证：输入人肿瘤动物模型，活体检测CAR-T对肿瘤的消除作用。

作者: maoyy2011 时间: 2016-6-19 13:29

顶一下

作者: chb611301 时间: 2019-7-30 15:56

需要详细点的资料

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