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标题: 造血干细胞与OP9-DL1共培养时，DL1基因来源？ [打印本页]

作者: Yorkshining 时间: 2014-7-1 14:34 标题: 造血干细胞与OP9-DL1共培养时，DL1基因来源？

如题，最近在做人造血干细胞向T细胞分化这方面的工作，借鉴别人的用其与OP9-DL1细胞共培养，但是实验室只有小鼠来源DLL1基因的OP9-DL1细胞系，无人源DLL1基因的OP9-DL1细胞系，不知能不能用前者替代后者啊，不甚感激。。。

作者: binglovekun 时间: 2014-7-10 08:43

是要自己构建细胞系的。人源和鼠源是有区别的。

作者: Yorkshining 时间: 2014-7-16 17:00

回复 binglovekun 的帖子7 l# Y( W( t4 ]" k* {+ |
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我要诱导人ESC,是否用人的DLL1序列会更好一些？

作者: Yorkshining 时间: 2014-7-20 15:42

回复 binglovekun 的帖子2 O( i T) _; M$ E

你是诱导人ESCs还是鼠ESCs啊，用的是人源DLL1还是鼠源DLL1啊？

作者: yuanyecat 时间: 2014-9-15 12:10

人和鼠DLL1基因是有去区别的，而且表达后的蛋白差异更大，是不同的，可能完全没有功能在人体系中。还有你说的鼠是大鼠还是小鼠？不过我建议你可以试试因为有些鼠蛋白也是有作用的，

作者: Yorkshining 时间: 2014-9-15 15:51

回复 yuanyecat 的帖子: [+ y" J+ J0 _* V2 x8 o* P* R8 B& g5 v

非常感谢！还想请教一个问题，不知您是否做过OP9细胞与hES的共培养，我的问题时在长时间的共培养过程中，OP9细胞的充脂现象会越来越严重，不知您是否遇到过这种情况，是如何解决的呢?非常感谢。。。。

作者: yuanyecat 时间: 2014-9-16 15:31

这个是脂肪变性，我们实验室有同事也出现了这个情况，更换了血清好了。血清一定要质量过关，血清也差不多是细胞培养的关键，楼主更换血清吧。% r3 A2 C5 E; ]% a$ D# G' w
有时候，血清同一公司，不同批号的质量品质也不同，所以尽量购买同一批号的，尤其是你以前用过很不错的那个批号。现在国内市场上很多血清都是假的，你一定要试试好的，然后多好一批多买几瓶。建议你换血清，否则这个op9你没办法培养。

作者: Yorkshining 时间: 2014-9-18 10:56

回复 yuanyecat 的帖子- g7 p" I8 b' F9 i$ M
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我用的是Gibco 10099-141的血清应该算高质量的了，正常传代时不会有，抑制5天以内也不会有但是过度抑制7天以后就特别多了，不知道你们的细胞过度抑制后是否有这样的情况

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