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标题: 求胎盘造血干细胞如何提取 [打印本页]

作者: 未来之星 时间: 2015-2-15 20:31 标题: 求胎盘造血干细胞如何提取

如题，谢谢

作者: wuxiao101325 时间: 2015-3-3 08:04

剪碎后用PBS冲洗，过滤，浓缩，淋巴分离液分离即可

作者: qiqishichaoren 时间: 2015-3-17 13:13

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你好，这种方式适用于一整个胎盘吗？( C t) V% E; u8 I6 [( U

作者: wuxiao101325 时间: 2015-3-17 14:23

回复 qiqishichaoren 的帖子2 P$ n' \3 `- W

当然，不过事先把不需要的组织如羊膜/绒毛膜等去掉的话会省事很多

作者: WHNbftz 时间: 2015-6-17 08:29

和淋巴细胞分离方法是一样的。但是貌似造血干细胞不止可以从脐带血中提取，骨髓和外周血也可以，科技是不断进步的，应该有这种可能，如果是这样的话，那就好了啊，就不用担心留脐带血，担心造血干细胞不够用的问题了。

作者: 蜗牛爱贝贝 时间: 2015-6-22 15:43

同意楼上的和淋巴细胞分离方法是一样的这个观点，操作大同小异。但不同意:不用担心留脐带血，担心造血干细胞不够用的问题了这个观点，首先造血干细胞的确可以从骨髓中提取，但是抽取骨髓要对提供者进行全身麻醉，对提供者身体素质和心里承受能力都是个考研，再次从外周血提取造血干细胞，目前还不现实，因为外周血干细胞含量太低了，目前和以后很长一段时间一时半半会是解决不了的，所以本人认为，造血干细胞最理想的提取途径还是从脐血中提取

作者: 蜗牛爱贝贝 时间: 2015-6-22 15:44

同意楼上的和淋巴细胞分离方法是一样的这个观点，操作大同小异。但不同意:不用担心留脐带血，担心造血干细胞不够用的问题了这个观点，首先造血干细胞的确可以从骨髓中提取，但是抽取骨髓要对提供者进行全身麻醉，对提供者身体素质和心里承受能力都是个考研，再次从外周血提取造血干细胞，目前还不现实，因为外周血干细胞含量太低了，目前和以后很长一段时间一时半半会是解决不了的，所以本人认为，造血干细胞最理想的提取途径还是从脐血中提取

作者: 洛古16 时间: 2015-7-21 10:58

前几楼说的，剪碎的方法，固然可行，而且方便快捷，但分离出的造血干细胞不纯，杂细胞很多。; E* ] F- M: p9 y6 V% P7 d
如果时间充足的话，可以采取血管灌流，经淋巴分离液分离的方法，这种方法获得的造血干细胞，纯度高，集落培养是生长率高。

作者: zhangjieyctc 时间: 2015-7-29 13:14

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灌注的这种方法应该只存在理论上的吧，第一你应该是通过脐静脉灌注的吧，那如何来解决凝血的问题，凝血的话你不好灌注，同时也不好回收灌注液，第二只通过灌注的话，最后收到的造血干数量应该也很少，第三如果是灌注消化液的话，那你收到的细胞同样杂细胞会更多

作者: zhangjieyctc 时间: 2015-7-29 13:16

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有两点疑问，第一如何来解决胎盘带来的污染问题，第二淋巴分离液的回收率低如何保证细胞数量。

作者: wuxiao101325 时间: 2015-7-29 14:30

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污染问题只能通过采集方式来解决了，剖腹产的基本能保证无菌，回收率不高可以考虑换一种分离液比如percoll，但是percoll虽然能得到很多细胞，但是与ficoll相比，细胞纯度和活率不如后者

作者: 洛古16 时间: 2015-7-29 16:23

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1 C! S Q6 z$ O
如何是在医院里研究的话，能拿到新产出的胎盘，凝血的问题是不存在的。灌流是动脉灌注静脉回收。外国文献是这样研究的。里面是添加AMD3100，可以将造血壁龛中的造血干细胞调动出来。我所说的纯度高是跟机械法做比较的，甲基纤维素集落培养的数量比之多很多。

作者: pcljsw2008 时间: 2015-10-9 09:46

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我也做的血管灌流采集胎盘血，但是遇到不少问题，第一个，灌流的时候胎盘母册毛细血管裂开之后灌流就无法采集了，第二个是即便灌流成功，一个胎盘里提取到的血液量仅相当于正常血液20毫升的样子，请问下你做的话这两个问题是怎么解决的呢，谢谢啊

作者: 洛古16 时间: 2015-10-9 13:49

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母亲一侧毛细血管如果裂开的不是很厉害的话，还是可以进行灌流的；但是要是裂口很大，那么就不太能灌流了，一般我们就不灌流了。8 q5 G3 F# W9 Z. h
第二个问题，灌流是要将灌流液灌进胎盘，会收集胎盘血及灌流液。收集液体少的话，可以尝试揉动一下胎盘，或是将收集管压低等方法。

作者: meredith603 时间: 2016-4-14 16:36

剖宫产可以无菌，但是即使是在医院的实验室，从手术室到超净台最快都要一二十分钟吧，很多毛细血管都凝了，将会极大的减少灌流后得到的血液量。有没有人试过在手术台旁就灌流的？胎盘是个封闭空间，只要接口处注意无菌操作，应当是可以收集到无菌的血液的。

作者: 随时准备下线 时间: 2016-6-22 17:26

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看文献说，可以从外周血提取CD34阳性干细胞，但是得提前用药物动员。

作者: 独自等待 时间: 2016-9-6 10:36

剪碎后用PBS冲，收集后HES沉降，浓缩

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