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309208770 发表于 2015-4-21 16:03

关于细胞密度细胞数量的问题

最近在养脐带间充质干细胞，我想问一下CORNING的75cm培养瓶，一瓶适合接种多少密度？还有当75cm的培养瓶中的细胞100%融合，那么可收获的细胞数大概是多少？

avbn 发表于 2015-4-21 16:52

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接种密度大概1~1.5*10的6次方，100%融合的话，可长到5~8*10的6次方不等，甚至10的七次方，要看长得有多密，不过不建议长得这么密集，细胞会衰老，建议90%融合后就要处理了，这样可保持细胞良好状态

lipd09@mails 发表于 2015-4-21 22:38

间充质干细胞接种的密度和收获的数量和培养的代次有很大关系，在低代次时接种的细胞密度最好是5000-1.5万/cm2，收获细胞500万-1500万/T75，但要代次较高一般在10代以上细胞的接种密度可能就得1.5万-3万/cm2，收获细胞可能就是300万-800万/T75。个人经验，仅供参考。:)

水念人倦 发表于 2015-4-27 09:12

一般我都是以8000的密度接种的，一般不会等到conflu到100%，一般到90%左右就会传了，大概能翻3-6倍吧，P6之前3-4天肯定可以传了，后面的不太好说。

关于90%是怎么看的，这个实在属于经验问题，可能看多了大概心中就会有自己的一个标准，80%会是什么样子，90%会是什么样子。

待我上个图，是175的瓶子，最近几次接种及传代数据的统计，有问题直接回复我就可以。

caustic 发表于 2015-6-5 16:05

不建议细胞融合度到100% 细胞生长绝对会有一定的稀疏之分，等你长到100% 融合度时，很有可能有些位置的细胞就已经脱壁了。

倒腾细胞 发表于 2015-6-13 09:20

前辈们原代接种和消化传代都要计数吗？

蜗牛爱贝贝 发表于 2015-6-13 10:26

细胞接种密度在5700-8500/cm2就可以，一般可以3倍传代，生长间隔2-3天，如果仅仅是实验，传代次数无所谓，只是到后期可能会有絮状物出现，过滤一下就好了，尽量不要让细胞到达100%，那样对细胞状态影响太大，无论是细胞形态或者流式结果都很不好，还有就是细胞接种密度可以在小一点，4天传代也是可以的，如果界中密度过大第二天一定要看细胞生长情况，免得细胞老化，对细胞很不好的

yahooyeah 发表于 2015-6-13 13:25

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是不是脐带间充质干细胞和骨髓间充质干细胞大小不一样哦，我为什么收不到那么多细胞，最多一个10cm dish收3-4*10的6次方。求教！

woshibotao_01 发表于 2015-6-14 09:34

我们一般接种T75时差不多7*10的5
长满差不多3*10的6

细胞海洋 发表于 2015-6-15 09:01

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