GIBCO 台盼蓝染液0.4%检测CIK细胞活率
CIK细胞培养,一个周期马上要告一段落,下面要进行细胞活性检测,我用的是GIBCO 台盼蓝染液0.4%染液,你们都是用的什么啊?用的时候是不是需要进行稀释成0.2%的啊,我老板告诉我们是用1滴cik细胞悬液和9滴的台盼蓝染液(不加稀释)!这样是不是不对啊?不明白 稀释不稀释要看细胞浓度的,胎盘蓝也用不到那么多,我们最多1:1,我记得好像是计数板周边4个大方格加起来100个左右应该是计数最精确的。 [i=s] 本帖最后由 gondobar 于 2015-7-17 09:06 编辑 [/i]0.4%就是成品的台盼蓝,不用稀释!配合样品当然是看样品浓度,在技术要求范围内即可。 cik和0.4%台盼蓝进行1:1稀释,台盼蓝就变成0.2%的了。 [i=s] 本帖最后由 aochongyu 于 2015-7-17 09:57 编辑 [/i]
我们用的是索莱宝的0.4%台盼蓝,我们先用生理盐水稀释1:1以后(具体我也不清楚,为何稀释),才与细胞悬液混合计数(当细胞悬液浓度很高时先几倍稀释悬液),我们是细胞计数仪计数 这个要看你的细胞浓度 [b]回复 [url=forum.php?mod=redirect&goto=findpost&pid=1313400&ptid=91935][color=Olive]cleargreat[/color] 的帖子[/url][/b]
对于细胞计数,胎盘蓝的浓度绝对不是重点,重点是最终计数时,细胞的浓度。
区别在于,胎盘蓝浓度过大有一些活细胞有可能也会被染色。
但是,这个过程也没有那么快,一般配好体系加上样,马上就计数了。
另外,赤藓红的染色效果比胎盘蓝要好,朋友们可以买来试一下。 不用稀释的吧,我们是台盼蓝跟细胞1:1染色的,问题不大。 0.4%的台盼蓝就是使用浓度。如果死亡细胞不多,以台盼蓝:细胞悬液=1:5——1:10的比例加入即可;二者加入的比例接近,因为死亡细胞耗染液,死亡细胞数少,染液加的多,背景色很深,不易辨识。细胞计数的标准密度以四个大方格在80——100个。 [quote][size=2][color=#999999]teahouse0802 发表于 2015-7-18 09:56[/color] [url=forum.php?mod=redirect&goto=findpost&pid=1315368&ptid=91935][img]static/image/common/back.gif[/img][/url][/size]
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对于细胞计数,胎盘蓝的浓度绝对不是重点,重点是最终计数时,细胞的浓度。
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赤藓红,没有用过,能说一下比台盼蓝好在哪方面呢?
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