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原代脐带MSCs培养,胶原酶消化20cm能获得多少细胞?   [复制链接]

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楼主
发表于 2011-5-6 14:50 |显示全部帖子
15CM左右的7天能有一个T75
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沙发
发表于 2011-5-20 13:48 |显示全部帖子
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; D  ]! |. y" |4 B3 H/ Z9 q8 B
; x+ `5 H" d( \% N/ s( U/ K7 L/ g* |7天一般是在-80%---90%之间,按照酶消化两步法,得出的细胞中干细胞的含量是在1/1750左右,如果单纯用胶原酶消化,干细胞获得率会比两步法高。但是考虑消化时间和成本的因素,我们用的两步法。
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藤椅
发表于 2011-5-23 16:36 |显示全部帖子
我们是用IV型胶原酶,浓度1g/L,恒温振荡消化3小时,3-5天就可以有80%-90%的融合度了。
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板凳
发表于 2011-5-24 15:38 |显示全部帖子
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一般5-7天就可以看见细胞爬出,我们图省事都是7天才移走组织块的
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报纸
发表于 2011-6-15 17:20 |显示全部帖子
你们脐带取的什么部分来进行消化的?我们用胶原酶消化是需要取华尔通氏胶来进行消化的,如果只是单纯的用整个脐带消化,那样必须延长胶原酶消化时间才行。另外我们的起始细胞密度是1x10~5/cm2,80目筛网过滤,并且离心去除上清。培养基是UItraCULTURE 无血清培养基。
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地板
发表于 2011-6-16 09:47 |显示全部帖子
如果是单纯的去血管后切小块消化,那么消化时间要延长才行,一般是消化过夜吧。
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