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间充质干细胞可以从血液提取么?   [复制链接]

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发表于 2012-10-15 09:30 |显示全部帖子
实验过程:
" M; I$ D) @% P; o抽取5 0 m L髂骨取材的骨髓血。肝素抗凝,PBS稀释三者1:1:1 , 将稀释液缓慢叠加于F ic o l l上 , 离心 , 吸 出乳 白色云 雾状单个核细胞, 洗涤离心 4次, 将获得的单个核细胞 以合适密度接种到培养瓶 中, 。 置 于3 7 ℃ 、 含体积分数为5% 的C 0 2饱和湿度培养箱中,2 d后全量换液, 以后每3 d换液, 并逐 日观察细胞贴壁延伸时间、 原代培养时间及细胞生长情况 。MS C 的纯化:待细胞融合达8 0 % ~9 0 % , 用胰酶消化 ,按1 :3传代,利用破骨样细胞与M S C对胰酶敏感性的不同, 可 以粗略分离2 种细胞 。并且随传代的增加,细胞会纯化并趋于稳定, 倒置显微镜下观察细胞形态。
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