干细胞老化的问题

tingting2113

最近复苏的间充质干细胞活力总是不好，出现细胞变大，多核，停止生长的现象。但是细胞才第二代第三代左右啊~~是老化了吗？为什么呢？形态类似附图。
9 C2 j* h- r+ o( g# L# x大家帮我分析下，有类似经验的，请多多指教。

tingting2113

回复 baby00000003 的帖子0 Q# R$ k4 v, t
( r$ f, P3 m: U0 s
10%胎牛血清的DMEM，培养箱应该没有问题，因为别人的细胞生长的不错。
& y6 O9 D- A( m" r冻存：冻存液DMSO：胎牛血清=1:9  取0.8ml 配合0.8ml 细胞悬液。（他人冻存，密度不详）! }3 G- M6 E  V; T# e
复苏：从液氮罐里拿出来置于塑料手套中，然后之家放在37度水浴中进行，待未完全融化就放进安全柜进一步操作，个人认为时间掌控的还可以。
/ G/ }; A5 z/ U) y现在就是不增殖，如果忍不住给消化了，直接死给我看！！

tingting2113

回复 帝国黑骑士 的帖子# K6 @* N$ u+ Y! z# n

5 M& U! \# {3 N( D& o5 B+ ]  W. \不好意思，这个并不是我的细胞的图片，但是我的和这个是一样的。之前是细胞生长状态挺不错的，但是这批细胞挺长时间没用了，期间搬了一次家，但是一直放液氮罐里应该影响不大吧~~2 w; Q( R: X( F4 Q% r9 @% `
您说的方法我会试试，谢谢

tingting2113

回复 zxd962735279 的帖子) f( C! J- X9 p3 ?6 D3 ~

/ d2 n+ A! c) c) g1 Q& k5 r) E恩，谢谢

tingting2113

回复 baby00000003 的帖子
5 [2 Q5 i. m, k* O
9 y0 ]4 a9 ], S0 O3 ?好的，谢谢

tingting2113

回复 帝国黑骑士 的帖子
4 U' m2 }, V0 o0 ]# _' [1 d& }, Q* i! a! J0 Y: r5 s
实在不好意思呢~~现在还没有权限加好有什么的~~~

tingting2113

回复 yooung 的帖子- ?: B' L! C/ n- R4 ^  e* U# S
% c- z" |- x2 r6 O  J4 L
非常感谢！！