跑胶出现三条带？

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P基因跑胶SOX2居然出现三条带？大家帮我分析一下我的这张电泳图毛病（任何毛病的地方都可以），欢迎批评指导

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% e  E# ]( M2 E/ g( B我也觉得中间是引物二聚体 但是我做的其他基因就没有这种情况

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# g4 u/ Y- r. j8 ^4 K: E& c
5 F1 c& m% }: I不可能是特异性扩增吧？因为片段差距很大啊 我的product length 是200bp  中间还有最下面的都在50bp以下  另外请问一下 你们设计引物的时候看Self complementarity 以及Self 3' complementarity的值么？他们跟TM值以及GC含量之间有冲突时该如何选择？有优先选择顺序码？谢谢

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回复 nichifanlema2 的帖子) X! V. e+ I( w( F0 \  T  w

3 k# j. O/ d4 L; o  P8 }Takara

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回复 king8 的帖子
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不可能是特异性扩增吧？因为片段差距很大啊 我的product length 是200bp  中间还有最下面的都在50bp以下  另外请问一下 你们设计引物的时候看Self complementarity 以及Self 3' complementarity的值么？他们跟TM值以及GC含量之间有冲突时该如何选择？有优先选择顺序码？谢谢

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我们用核酸染料是Gelview

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回复 nichifanlema2 的帖子$ |6 f* p3 g4 x2 J# {5 [' c" y

# o7 f, ~* o4 Z. \4 D+ D我是按照引物合成回来以后引物管上标注的体积加对应的TE buffer溶解以后再用水稀释十倍的 （取10ul到另一个新的1.5ml离心管再加90ul无酶水） ！  这样浓度还大的话该怎么稀释呢？你们一般都是怎么稀释引物呢？