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本帖最后由 细胞海洋 于 2010-2-25 20:16 编辑 9 b' w, U, C8 X9 d5 y
$ C* u" K/ a2 v7 U以下内容由黄吉均版主整理。
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1 t( u& ?. ] w大家好,我叫黄吉均,现在是中科院健康所的硕博连读研究生,很高兴收到细胞海洋版主的邀请,感谢他给了我参加这次讨论会的机会,其实我也是刚刚才加入干细胞之家,是个完全的新人,但从一开始我就喜欢上了这个论坛,不仅因为里面有很多学习的资源,更应为它为我们研究干细胞的人提供了一个互相学习,互相帮助的平台,中国的生物学要更好的发展,这样的论坛是很需要的,这是光考一个实验室,几所大学所不能提供的,需要全体生物人的努力,所以我立刻向海洋版主申请当了版主,呵呵,希望自己为网站的建设出一份力吧。正好我看到论坛里贴了我们实验室发的文章,所以就有了这次和大家交流的机会。我的主要研究方向是胚胎干细胞向心肌细胞的分化调控,本期讨论主要介绍我师姐的工作。
}! p$ q) S& F6 j# Z本期研讨会主题:三型三磷酸肌醇受体在胚胎干细胞分化中的作用8 @; O# k& j4 a7 ^
主要相关文献:2010年1月15日, Cell Death and Differentiation发表的
- g% I- ~) _* Y2 K, i2 x: t/ M% k0 tType 3 inositol 1,4,5-trisphosphate receptor negatively regulates apoptosis during mouse embryonic stem cell differentiation! R/ |! i/ @, E& L# f
研究背景:
P4 b O$ D" n9 _干细胞是当今生物学领域的研究热点,也是很有应用前景的生物学分支。我们实验室自2002年成立以来,以胚胎干细胞为研究模型,围绕着钙信号这一主线,致力于探讨胚胎干细胞向心肌细胞分化的调控机制,以及低氧对缺血性心脏病的保护机制。' g: V8 W }" d* ?9 y" g
钙离子是我们再熟悉不过的朋友了,相信大家都听过小孩、老年人要“补钙”这样的说法,这里钙的作用是促进骨骼的生长,其实钙离子的作用远远超乎我们的想象,从受精作用开始的一刹那,钙离子就发挥了它奇妙的功效,在细胞凋亡中它又扮演了“终结者”的角色,可以说钙离子与“生”和“死”都息息相关,难怪最近出了一本专著就以《生死攸关的钙离子》为题的(Calcium a matter of life and death(瑞士)Krebs,J.)。我们今天要探讨的就是一种钙离子通道――三型三磷酸肌醇受体(type3 IP3 receper, IP3R3)在胚胎干细胞分化中的作用。
( Z# j+ @ A$ D- ?3 H: w/ s* b三磷酸肌醇受体是在细胞质中内质网上普遍表达的钙离子通道,它有三种亚型,IP3R1,IP3R2,IP3R3每种亚型的分子序列相似性在70%~80%之间,都有IP3和钙离子的结合位点,但在特定细胞类型中他们表达水平不尽相同,IP3R1主要在脑组织中表达,且它在神经发育和大脑功能的完善中发挥着重要的作用,而IP3R2和IP3R3在许多组织和细胞类型中都有表达,而目前仍缺乏特异性的单亚型抑制剂,所以要分别研究IP3R2和IP3R3的生理功能仍然是难点。已有报道在脊椎动物胚胎发育早期需要IP3介导的钙离子释放,但并没有明确每一种受体亚型在这个过程中分别起到了什么样的作用。最近的研究还发现在斑马鱼卵子受精之后就伴随有IP3R3的表达上调,这就提示我们IP3R3很可能在胚胎发育早期起着重要的作用。而在小鼠胚胎干细胞中也能检测到IP3R3的表达,因此我们就以mES为模型,来研究IP3R3在胚胎干细胞分化中的作用。
" V0 k6 ]0 ^# Q3 j4 \4 }研究结论:我们很惊奇的发现IP3R3下调不影响mES的未分化状态,而影响了其分化过程中的调亡调控,IP3R3下调的细胞其凋亡增加,进一步研究发现这种影响只在中内胚层细胞中的发生,其结果是mES向中内胚胎分化能力下降,而外胚层的分化缺不受影响。这就提示我们正常的IP3R3很可能在ES分化早期扮演了抗凋亡因子的作用,而且这种作用是中内胚层分化所必须的,至于其抗凋亡的机制,还有待更多的研究来阐明。
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Diane C. Slusarski Dev Biol. 2007 Jul 1; 307(1):1-13.
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6 Q0 t, g. G/ H" u: ?9 c( ?. e相关技术:RT-PCR,western blot, RNAi, 细胞凋亡检测(TUNEL,annexin V),细胞增殖检测(MTT, BrdU), 流式细胞检测(FACS双染),钙信号检测(Fluo-4, confocal): A0 R# ^' e. l
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参考文献:& {* O4 P( g7 k
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