提SD大鼠的MSC的两个相关问题，请教大家

baichunyu

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percoll的配置是：一份十倍浓缩的PBS加九份的PERCOLL原液配成浓缩液，在配成1.077密度，60%的浓缩液加40%PBS。但是1.077是分离人血液中单个核细胞的密度，大鼠的是不是密度不一样。关于BMSC的分离，全血培养法和PERCOLL分离法均可用，全血培养法的优点是细胞活力强，细胞生长潜伏期短；但是细胞较杂，要传几次代才纯化。percoll分离法，细胞较纯，但细胞生长潜伏期较长，且时间较长。建议用全血培养法。

zlz2626

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zlz2626

11# baichunyu
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# J( A2 G/ W# V  ?/ P  d: E/ X谢谢你的指点。想问下：我传的代多了 是不是有可能分化啊？因为后期我还要转染质粒进去 做稳筛   之后要将其向软骨方向诱导   用全骨髓法提的细胞可以嘛？

baichunyu

13# zlz2626
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: g; ^# p: j, Z/ ?全血法应该可以，干细胞随着传代，其干性也随之下降，维持其干性也不是件容易事。我见过一篇文献报道，间充质干细胞向心肌诱导时，已五代以内的细胞较好，成功率较高，你尽量保证在干细胞前几代之内诱导吧！大家一起讨论学习。

zlz2626

14# baichunyu ) I! c3 |. P$ P

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* e( T* S- @3 ^% b6 e这方面的  文献 我也看过一些 ，所以心里没底。  在有就是一个鉴定的问题，除了流式  ，是不是还需要 做诱导分化呢   只有具有分化潜能的才是干细胞吗？ 不知道在这方面  你有什么心得？请教

mag2722

全骨髓培养法