骨髓间充质干细胞原代培养换液问题讨论

tiangao

大鼠骨髓间充质干细胞原代培养换液大不相同。1时间：有人取材30-60min后就换液，24和48小时各换液一次，以后每隔3-4天换液。2换液量：有的半定量，有的全换，何时半定量，何时全换？3去除杂细胞：有人说贴壁杂细胞很少，有人说贴壁杂细胞很难去除。怎样行之有效去除杂细胞呢？如何高效率得到较纯的BMSC呢？请大家分享你的心得！

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分离后第二天换就行了，我们都是这样做的，效果很好

tiangao

第二天都贴壁了吗？不是5天才换吗？

tiangao

我也在养 请问有用密度梯度法分离的吗？效果如何 我第一次提的基本没长 还有就是 细胞一贴壁就开始形状改变吗/

tiangao

我是36小时首次半量换液，然后72小时全量换，以后隔天换一次，效果还可以

tiangao

我是新手，关于细胞培养换液有很多疑问，请各位给讲解一下：0 f+ M, `4 W/ d' k3 i
1，骨髓间充质干细胞原代培养液为何种培养液？
7 U7 ]2 M- p2 ~  p( B# }5 f2，半定量如何操作？/ v7 i. q9 d, ^. ?
3， 全骨髓培养法分离培养骨髓间充质干细胞，不是等到7天左右，观察到典型的细胞形态后才进行传代培养吗？4 L4 u; Z" ]) F( A4 p
4，细胞如何进行计数？
8 \5 O) F5 O0 F. w新手，这些问题都是最基本的，请各位老师别见笑。***！

tiangao

我一般在分离后的30小时换液，以后就2－3天换一次，效果很好。

tiangao

文献多数是密度梯度离心来出去红细胞和白细胞，这样接种就5天换液，如果全骨髓培养，报道是48小时，但是我培养的换过液后细胞就非常少了。强烈建议按照文献密度梯度离心后5天第一次换液。

tiangao

再抛一个问题，传代的BMSC怎样换液？

tiangao

我做的是全骨髓法 3-4天首换液 传代的BMSC2-3天就长满了 中间不用换液 只要培养基颜色正常就不要换 频繁换液对细胞也是损伤