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楼主: a352167963
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你认为组织块贴壁法和酶消化法培养脐带间充质干细胞哪个方法更好?   [复制链接]

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发表于 2014-4-10 17:20 |只看该作者
回复 wf78365421 的帖子
) V7 M% v5 [: `5 S' _
$ i  |1 P1 B$ K6 N: t( |' d成纤维细胞怎么才能去掉

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发表于 2014-4-14 22:01 |只看该作者
目前尝试组织贴壁。 等效果ing

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发表于 2014-4-15 23:26 |只看该作者
组织块法 但是周期长
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发表于 2014-4-17 11:33 |只看该作者
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组织贴壁法,比较简单,对细胞损害性小,就是周期长。酶消化法周期短,2个小时左右就完成,但是由于组织体积不一,所以无法控制消化酶浓度,容易由于消化时间过长,导致细胞损害
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金话筒 优秀会员

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发表于 2014-5-22 17:15 |只看该作者
组织块法:操作简单,养出的细胞活性较消化法更好,但培养周期更长,一般需要15-20天。1 Q& S+ e8 ~3 y# o0 i
消化法:操作繁琐,消化后一般很粘稠,需要稀释过滤,易引入污染,细胞损失也较大。因被酶处理,所以养出的细胞活性较差。但培养周期短,最快的一周时间即可收获。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员

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发表于 2014-5-22 22:29 |只看该作者
1.组织块贴壁法操作简单,种瓶前实验操作耗时短,对细胞基本无损伤,一般需要10-12天就可以传代。组织块贴壁法细胞得率高于酶消化法,持续培养可以保持干细胞特性到很高代次。
( s7 t6 T. C4 j+ \- K0 M3 o2 .酶消化法在前期处理过程比较麻烦,需要2-3小时的消化时间,消化过程对细胞损伤大,细胞碎片较多,一般需要5-7天就可以传代,但是持续培养细胞容易衰老。
# ^" h) ?: S5 J# z1 R! E& O- {我认为组织块贴壁法优于酶消化法。
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发表于 2014-6-12 15:55 |只看该作者
关于这个问题,我们做过对比试验的。1 f$ q8 P6 }0 T! |% U! Q( B: v! u
   组织块贴壁法:操作简单,不需要胰酶消化,对细胞损伤小,大约7到12天就可以长出,我们最快的5天就出来了,然后大约等待5到10天就可以传代了;对于上面大家讲的不纯,主要是外面的皮和3根血管没有去除干净,才会不纯的。2 n/ l5 F6 O( o5 j5 l& ~' \
   酶消化法:对细胞损伤大,大约5到7天就贴壁了。
" i1 ~- H! w! a2 w5 |' V" d: w 二者相比,组织块贴壁法获得的细胞数量多,而且可传代性强,传到10代时,长势和3代相差不大,我们也做到传至50代的实验;酶消化法,一般到了8代就长的很慢了。
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发表于 2014-6-15 13:18 |只看该作者
本帖最后由 倒腾细胞 于 2014-6-15 13:19 编辑
4 ]* R5 j( ], A7 p. S( u. r- j) H! o& i8 w# B
培养SD大鼠的BM-MSC是不是比人脐带间充干容易很多呢?不过做了一次就换做老鼠的了...

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金话筒 优秀会员

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发表于 2014-7-1 09:38 |只看该作者
以前做过两种方法的培养实验,培养周期,楼上都说了。现在实验室如果不是时间很紧的话,大都使用组织块贴壁法,好处是显而易见的,过程简单,操作步骤少,不易污染,还有细胞损伤少。大家都知道,细胞处理次数越少,其生长状态是越好的。再者酶消化,时间、消化程度没控制好,就game over了,啥都没了。当然如果是短期内就要得到足够量的细胞,酶消化法吧,速度快是他唯一的优势。
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小小研究员

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发表于 2014-8-1 18:35 |只看该作者
组织块法对细胞直接损伤小,元代培养细胞纯度高,简单、经济,但所需培养时间长。  n7 n; x2 e1 p% U. d9 R2 h
酶解法获得细胞数量大,培养时间短、但细胞纯度略低,细胞可能因为消化的损伤而无法贴壁生长等
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