无血清培养中终止胰酶消化

jojo1988509

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7 m# n# o& B% Z2 J9 \" B3 r你可以就用你的培养基，但你动作快点。

杏色玻璃

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7 h, t' ?7 r8 n9 V0 m. T
2 O8 a) }' I9 A0 P4 b谢谢

qiqishichaoren

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7 k5 E/ F* s* N) D7 |! x# B有试过至少要几次离心洗涤吗？
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qiqishichaoren

回复 杏色玻璃 的帖子2 T; Y) g- N- c

( [6 x! X% j: X$ W0 A. J/ O  \( n& j! v没用的，你的意思就是不用终止，离个心就直接种瓶了，这里种瓶就有培养基了是吧，可是我试过这样做，细胞贴壁差，贴上也长不好。感觉无血清培养基里的蛋白对胰酶来说并没有什么LUAN用。

nkcell

清洗3遍就可以了，不会对细胞损伤很大
& f+ @) J- H/ O6 W! j

飞飞飞

应该加培养基就好了

帝国黑骑士

就用原培养基稀释，操作作稍微快些，然后洗个2-3遍就ok了！

309208770

回复 杏色玻璃 的帖子* {2 @$ M4 x& e; l" O3 `: w
/ S7 X1 y; |3 V( z- X6 U
无血清培养的话，在胰酶消化后就可以用无血清的完全培养基终止，我一般都是1:1的量，然后加入PBS稀释，吹吸，离心两次，就可以了

309208770

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' e/ L0 l9 `6 l' M
) X  h0 C/ h% E6 W2 h) V" Z8 e我用两次离心

edwardellen

不用买那些奇怪的抑制剂什么的，直接加培养基把细胞吹下来，之后离心弃上清就行。
3 Y& l( Q; M. L3 Y$ Q2 \9 z我以前也纠结过这个，总觉得不放心，直到有一次，我特别着急要稀释胰酶，但是恰好PBS没有了，就顺手拿了基础培养基稀释胰酶。
! D0 a/ B  N' u+ v( u然后呢，稀释的胰酶根本就不好用，细胞一点都消化不下来。
, {$ T& L0 h6 ~. W从此以后，我深刻的明白了有些缓冲液的无钙镁离子的要求，而且再也不纠结如何终止胰酶的问题了。