牙髓干细胞培养已经7、8份了，都有完整牙髓，且都是按文献上来做的，就是不长细胞

zww1513

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$ n% E/ T% n# ^; r; k" @( Y牙髓干细胞培养已经7、8份了，都有完整牙髓，且都是按文献上来做的，消化、组织块、消化组织块等都有尝试，就是不长细胞，不知道关键处在哪？求助!

随时准备下线

你应该不方法过程说详细了，别人才能帮到你。

五口二木

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你用的培养基以及血清是哪个牌子的？/ F4 T& p$ D  e  C+ n6 I

zww1513

回复 随时准备下线 的帖子! p2 l) K4 d9 R/ U

  ?% F# \; I9 f谢谢你的回复，方法都是按文献上来的，方法都试了6、7种。主要还是消化、组织块、或二者结合的方法，文献上都能做出来。我想问的是关键的步骤在哪里？有这方面经验的应该能提提建议，对于新人，一直尝试下去不出结果很纠结！

zww1513

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0 c" M  `) n+ Q2 a; l" a5 N' `1 d$ v9 T$ M4 g1 g# x+ i3 K0 a3 A( C7 Y
培养基用的Lonza,血清用的FBS，牌子就不知道了

五口二木

回复 zww1513 的帖子2 U1 s) ^& j5 x% ^. K! e
0 p8 b, |5 O' Q
我用组织块法，将牙髓剪碎，用少量含15%FBS 的培养基（韦森特、海克隆都用过，效果都挺好）培养，大概3、4天就有细胞爬出，10天左右可以传代了

zww1513

回复 五口二木 的帖子, O* E6 q) \0 x. F7 u

. }( p" ~3 E( L7 J0 ?好的，谢谢！
$ V5 ~, g. U' d0 Q2 R组织块法我们也尝试，不过开始没有加FBS。

gondobar

原代细胞基础培养基加15%-20%FBS（5000以上的血清，推荐Gibco，hyclone）

swtarron

请问你提取牙髓时，用的什么工具把牙冠弄开的啊？