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楼主: jiandie
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分离脐带间充质干细胞,收标本问题   [复制链接]

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发表于 2017-5-25 16:28 |只看该作者
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9 h6 k$ M3 t) v2 o' j
) R5 l) N, m5 j谢谢,你们一般处理脐带多长时间
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发表于 2017-5-25 16:28 |只看该作者
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9 {* ?7 P8 j& l
& `3 H( Q; U+ B' F- N+ `0 t没拧紧的倒是也没污染
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发表于 2017-5-25 16:29 |只看该作者
回复 444352110@qq 的帖子
& L) }8 r# v; q
- I9 ?7 z2 o& I! a操作两次是差不多的,可能是处理时间太长了吧。。
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发表于 2017-5-25 17:02 |只看该作者
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标本的问题吧,我们处理都是很随意的也能长
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发表于 2017-5-26 09:10 |只看该作者
jiandie 发表于 2017-5-25 16:25
, y+ _/ B1 I% O1 Q/ {回复 zuishui 的帖子
  A0 _% u* ~9 j6 T; {% I
- s! u# m2 q1 b8 y- ]第一次出细胞贴壁,第二次没出细胞。。
4 P6 I% |! I/ a. j
我是问贴没贴上壁,是不是因为没贴上所以不出的~
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发表于 2017-5-26 09:11 |只看该作者
你没有提到你用的什么培养基啊,难道干贴啊?
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发表于 2017-5-26 10:47 |只看该作者
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' [5 n) N- ]( G% Q& d
6 z, s, _& f8 x7 b先干贴让组织块贴壁,6-8小时加DMEM/F12
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发表于 2017-5-26 12:01 |只看该作者
收集脐带注意事项:1、脐带保存液无菌,脐带保存容器密封性要好,采集脐带时最好进行两端结扎(取中间部分)    2、运输温度4度最好,常温放置几个小时问题不大    3、从采集到分离时间间隔24h是没问题的,肯定可以爬出细胞   4、分离前最好用75%酒精对脐带进行清洗,清洗时间不宜过长   如果上述几点都没问题的话,那就不是采集导致的了,可能是脐带本身状态不好或者培养基不行 。     
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发表于 2017-5-26 17:00 |只看该作者
体系的问题,我们采集的样本都是很长时间的,72小时都没养不出来的。一般来说要求48小时内。你的采集方式影响不大,关注培养体系,即使你培养出来也15天了,时间太长,这个时间我们基本都可以冻存了,用的就是贴壁法
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发表于 2017-5-28 07:18 |只看该作者
最近培养的一根脐带,25天才爬出几个细胞,培养脐带需要有耐心等待,不要轻易放弃。0 b7 ^0 t, w+ a8 F' F1 q
双抗清洗时我一般浸泡5分钟左右。
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