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细胞复苏有哪些地方需要注意呢,为什么我复苏的细胞死了那么多   [复制链接]

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发表于 2017-6-27 09:47 |只看该作者
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* p! A/ F  `4 w7 Q
  x  p! u" S# }) F细胞复苏时间要快速,在水浴锅复苏时,可以适当的摇晃,加快融化速度,最好在30s完成,不能超过60s,不能速融对细胞损伤较大,不利于之后的培养及使用,还有在复苏是要提前准备好盐水,速融之后马上稀释离心。
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发表于 2017-7-4 11:38 |只看该作者
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) ~5 ^  N7 j+ g$ y; Q' V
! y2 ~. a1 z' ?% W( k* r% X+ l再次请教一下,用这种方法的话,细胞液是全部融化再转移还是剩一点冰晶就转移
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发表于 2017-7-5 13:58 |只看该作者
操作速度快、细胞冻存液除去,当天换液+ p5 |4 H7 J0 H
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发表于 2017-7-6 16:17 |只看该作者
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回复 long3390hai 的帖子; e1 L. X6 M0 x- ?1 g. K# h
) A% v2 |6 d3 d" ]3 L/ N3 S
龙啊,你真是理论王子,实际操作肯定超过60s
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发表于 2017-7-6 16:18 |只看该作者
回复 爱学习的青年 的帖子. y; j: Q6 _3 Z8 s7 q- r
4 z! A+ q! A. ]: p: F
剩下冰晶就行,等到全部融化了,温度上升很快,温度高DMSO对细胞的毒性就高了,影响活率
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发表于 2017-7-6 17:07 |只看该作者
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) M6 b6 \7 I) M' m. N/ j: ?! V( w1 j
( d, l0 k1 o5 X2 C2 a" j" U) E练习次数多了就OK的,我的理论还是可以的
9 Z) Y! D# H) h$ ?# x
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发表于 2017-7-6 17:20 |只看该作者
回复 剡溪兰客 的帖子
5 ~  W( {$ t: ?/ b9 ^1 f! g, Q8 \; M6 l3 ^$ R
谢谢,这几天正打算复苏细胞,就按这方法复苏

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发表于 2017-7-7 14:09 |只看该作者
回复 long3390hai 的帖子
4 T, ?5 o7 O7 |+ b2 Q# x1 {8 E  H  Q8 ?, K" t. _; J, k
这个逼给你满分了,练习了几百次了,哈哈

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发表于 2017-7-7 17:40 |只看该作者
wuhuaguo88l 发表于 2017-5-31 15:15 / l: u6 J: I: \. z! @
当天复苏可留少许细胞,测一下活率,若活率不高,分析一下是否当天操作不当或是细胞冻存就有问题;若是活率 ...
. p. o. G. V( A! ?- V" \& a
这个也是我想知道的问题,前几次都可以的,为什么这次不行了,细胞数还是冻存技术的问题呢?
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发表于 2017-7-7 18:15 |只看该作者
rzghc 发表于 2017-6-1 08:33
7 n" ]1 b* I0 b" U先准备好水浴锅,复苏的时候用冰盐水,不要等细胞全融化,稍微有点冰晶的时候就可以操作了,操作过程中基本 ...

; m1 P+ I& l2 a  T- t这里有很多行家,学习
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