提大鼠的骨髓干细胞，但提出来的怎么都是无核很小的细胞？

jiojoo

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" H4 w5 j# S8 s" t6 v: e接受版主意见，发此新贴
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2 N. c4 D" Y7 L6 a/ S. @; f小弟也在提rat的骨髓干，第一次提，提出来了，后面再提就提不出来了5 N0 Q; j5 B; h6 w6 ^) {- d
其实程序也就那个样子，只是我在泡骨头时用的庆大浓度比较高，几K个单位/ml, L5 q  a0 o& }3 P+ w
然后骨髓冲的非常彻底# }' f! I' m$ V+ q1 w: u0 N4 C6 k: p0 F
提出的细胞都好小啊，好像还没有核1 w' q1 s# d4 C7 h' M& w
各位帮忙看一下吧，我这里这几张图片，细胞好纯啊，不知提出来的都是什么细胞
1 @/ a- R9 \& [这些细胞胰酶消化似乎比较困难，但也看不到正常的骨髓间充质细胞) l1 u* y) [, X+ ^8 U

- }) }1 A% X1 \, r7 f$ A) [# a7 v. z' u4 ]

0 U$ o0 T. w; m6 c- I* z# i& a% p! Z# X7 j1 L1 ~5 p

皮搋子

首先要知道你这是第几天的？# C) [7 ^4 P6 O5 d# k6 v" H
刚冲洗的全是细小的圆形无核细胞，因为那是在骨髓中的正常形态，到了体外培养贴壁2天之后才会变成那种细长的。
1 T$ ^, v+ _/ U1 @/ M记得第一次换液，动作要快，将上面漂浮的死细胞全部洗去，然后严格控制消化时间，不要害怕丢细胞，宁丢勿杂。
, [1 @1 Z  X  c, e- O培养到P5的时候做个成骨成脂诱导。

可怜的孩子

刚开始养BMSC的时候，常会出现这种情况，多养几次，会越来越好的，很多人都说24小时首次换液，我习惯3天后换液。常看到成簇的克隆存在。

jiojoo

回复 皮搋子 的帖子: e- A" s1 H) v% j: r! ]8 e: [

1 M- J- g+ |, g这都是传过两次代之后的细胞了8 E% L! ]0 S% k" A$ F3 k4 F& j
可能真是是别的杂细胞% b$ Z% |4 c  y7 O, M
因为这些细胞都消化很困难

viv2005

我倒是从颅骨分离osteoblast细胞的时候遇见过这种很小很难消化的细胞，同样不知道是什么东东。消化20分钟仍然吹不下来# M' ^  x2 N. j" i3 a4 Z  e