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楼主: NK细胞
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[请教] 关于细胞复苏   [复制链接]

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发表于 2011-10-9 10:35 |只看该作者
回复 meister 的帖子: p0 `/ Y$ `8 s/ O; H! |% p

. [' W0 F1 }/ S5 F3 K- L3 ]" D, t, w2 S哦,就是说那些絮状物是一些死细胞和杂细胞的混杂物,诸位对降低细胞死亡率和提高纯度有什么建议吗?
8 F8 |& E/ f3 ?

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优秀版主 帅哥研究员 积极份子 小小研究员 金话筒

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发表于 2011-10-9 10:37 |只看该作者
有可能是细胞里面的基质流出来了,有一段时间做打孔就经常后造成絮状物。3 K; \( O. d0 Q$ F4 ~! y
当然这只是我的猜测!
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发表于 2011-10-9 10:54 |只看该作者
莫不是把细胞给冻伤了或复苏时形成了冰晶把细胞弄破了,谢谢楼上。
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专家 优秀会员 金话筒

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发表于 2011-10-9 13:42 |只看该作者
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回复 NK细胞 的帖子
: N! E' J( v  ~2 }8 l7 p" p; p4 W. `: G/ o% U/ c+ @9 F2 a/ m
目前主要用羟乙基淀粉沉淀法获得脐血干细胞, 纯度很低, 产业化应用,干细胞 库5 }$ A# o+ s' z9 f
利用ficoll纯化没有以上问题,实验室经常使用
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发表于 2011-10-9 15:10 |只看该作者
活的细胞密度过大,放置久了也会有结团现象,从而肉眼也能看到类似棉絮样的东西。
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发表于 2011-10-12 22:04 |只看该作者
血清质量问题?里面蛋白析出了~建议先培养,才可以排除是不是细胞死亡。
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发表于 2011-10-28 08:59 |只看该作者
xuexi l ) r: I" V6 O+ p- m" O

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发表于 2011-10-28 19:43 |只看该作者
DMSO对细胞是有毒性的,每次复苏都会有一些死细胞,那些团块肯可能是细胞碎片,也有可能是冻存前,消化时没有吹开,还有一些细胞保持着细胞间连接,复苏时就会出现小团块。
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发表于 2011-10-28 22:14 |只看该作者
有可能是冻存的时候就留下的,加冻存液的时候要慢些,要不对细胞很有伤害的。可能就是冻存液这样杀死了一部分细胞。用的时候过滤一下吧
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发表于 2011-10-30 11:06 |只看该作者
1 你没有吹散的细胞团; d: g. L- Q8 v" s
2 血清中的蛋白凝集物
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