请教小鼠原代脂肪干细胞的形态及分离培养条件

avbn

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7 u! I* @" e6 n/ \回复 your1024 的帖子
- @7 ?  K% J, \1 ~5 [5 V
* l7 r) t3 u! E8 `& ~' n多谢指导，我做的是小鼠，每次是只取一只小鼠的脂肪吗？以前也做过人的，感觉小鼠的细胞特别小。

your1024

回复 avbn 的帖子, T' H  n/ H; v! E$ Q% V+ a7 p

9 b; R$ Y! Z$ u7 ^0 C' ^7 p当然不是了，我是说取一只的情况下。如果要大量培养，取7、8只也没问题啊。是，老鼠的脂肪不多，所以几乎每次都还要取点背部的作补充。

dj_hust1987

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取附睾脂肪垫比腹股沟脂肪好一些吗？附睾脂肪是不是位于腹腔里面啊？

sunflower636

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- N/ W2 D1 j1 C% g3到4天都不换培养基吗？细胞会不会营养不够啊？

your1024

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* ?/ a+ k, b# X, u4 C. x) w& I5 c7 T8 C9 ~# q9 l7 _* Y$ ~% b
刚开始的时候稍微加多一点培养基，是没有问题的，至少我们这么做是没有问题的。3~4天的时候你可以小心的观察一下，如果培养基变黄了，可以换液。如果这时候看到细胞还是没有爬出来，其实也可以让它继续等等。这个做多几次就大概能摸出来了，我们当时刚开始做的时候都有放6、7天不管的，我们做的小鼠，ADSC很皮实的。

your1024

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+ {' n: O, W0 C% d! v/ f  v7 v7 u4 O: B: x7 t8 V
其实关于取多少细胞、加多少液体、什么时候换液、什么时候传代、怎么传代这些问题，很多实验室都有自己的一套方法，你在听取大家的意见之后，还是自己摸索一个适合自己和实验室的路子比较好。

sunflower636

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: [( B9 T! B7 G* e/ j# B2 }5 x. Q3 T1 k9 b, }$ u; N% N4 A* r
嗯，看来还得继续摸索了。我做的是人的，2到3天我根本没有看到细胞贴壁，一点都没有，下次我试着初次多加培养基，这样看看时间久点它会不会贴壁。漫漫之路啊！！

your1024

回复 sunflower636 的帖子5 x- n% t/ j7 {$ v0 J4 ?9 }

1 S- A  ~, z  v3 u$ ~/ u( v% Z# K5 o+ Z人的细胞应该是比较慢一些，实验室有人做过，我没做过不好说。不过我觉得2~3天没细胞可能还正常，一点不贴壁恐怕是有些问题的吧。

sunflower636

回复 your1024 的帖子: q5 S( j7 S9 t- a, e8 a4 C

' ~$ t) c4 ]5 |9 V) h4 p# Y0 K哎，最近各种抓狂啊。多谢各位前辈的指导，我要继续摸索，希望有了好消息与大家分享的那天！

wiling123

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& f8 o) j4 }% x/ _. X& }
6 v7 p4 m/ Y% R( G; @# R  r6 b你好，我最近也在养小鼠ADSCs，一直养不好。你的小鼠脂肪干细胞培养步骤能详细说一下吗？。谢谢啦。