细胞状态一直不好，大家看下细胞表面和细胞之间的小黑点儿是不是支原体污染

待鹤

回复 20# foxp3 ) W9 }3 k9 a' v6 _9 Q7 Q* J. M5 F& i+ T
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$ u' _: |+ @1 h' L. q+ T 脐带间充质干细胞. o  e+ [7 V* b( R& U5 _  H
原代细胞 细胞一直是这个状态 长得慢 传代后也很难长起来

gapchui

原代的都是成纤维状的 而且长密了会成涡旋状, f+ f+ }2 j  Q4 w
你这个像是老化了 或者是杂细胞吧

cortex

回复 18# 待鹤
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    那你再养养看。你第二张图片看起来还可以啊。* F% Q$ ^" N+ E  r4 p5 F
   传代后再养，如果还是长的慢，建议做一下支原体检测。

dragon513

我的细胞传代次数多了也曾经出现过类似情况，形态有点乱，不是那么典型了。我重新做的

dragon513

我的细胞传代次数多了也曾经出现过类似情况，形态有点乱，不是那么典型了。我重新做的

decloud2009

我们也有这个问题,是不是像小蝌蚪一样的,会原地转圈圈的,我们管这个叫黑胶虫,谁知道是什么,好像是血清的缘故,我们现在都用0.22filter过滤,不过出现以后,很难就去掉.这个东西,细胞密度高,可以抑制它的生长,,,勤换液,多用pbs洗吧,

ambassador

在细胞培养的时候，有时会在400倍显微镜下看到小黑点在动，小黑点有时呈点状，有时呈小的片状，运动形式为在原地振动（类似布朗运动），这种小黑点既不是细菌、霉菌，也不是支原体（我们曾经请周守长用血平板培养过，没有菌落出现），目前业内人士称其为“黑胶虫”。9 J0 [/ x" {4 j2 h+ A6 x
    个人觉得是血清的问题，处理方法可以参照如下：
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- ]5 ]8 N3 \0 u! }' ~# S9 v; N. k    首先，血清买回来灭活前冻融应逐级冻融，即按照-20℃——4℃完全融化后，再置入水浴中，与室温一起升高到56度，这样的目的是避免温度骤变，导致血清中的营养物质丧失活性。/ ?8 U& a6 y' H! {4 l2 ^$ Z
　　第二，血清灭活后分装保存。按照每次用血清的量分装，尽量减少血清冻融的次数。分装时注意无菌。/ }+ W( R# F! g* o$ f# |3 a
　　第三，细胞培养时血清浓度稍大一些。通常细胞培养血清浓度为10%-15%，但如果血清冻融次数过多，那营养物质丧失活性，按15%的浓度配制事实上达不到15%的营养成分，故培养基配置时一般用18%-20%的血清。

翠晓灿阳

也遇到过这种情况，感觉是细胞自身代谢的原因，用PBS洗，勤换液，细胞就会慢慢好起来。

treestem

也有可能是凋亡的细胞碎片吧

liutianzhu

楼上说的很对，1一般细胞污染，培养液会变得浑浊，但是支原体的污染大多都是清亮的，它使得细胞生长变缓慢，形态也改变，还出现黑点，电镜下可以观察到。2细胞凋亡后的碎片也有可能出现黑点，但可能性不大。3同时血清质量的问题也有可能。4原代的培养要比传代后的慢。