脐带MSC真是mSC吗？还是成纤维细胞？

henryjia

回复 jack1381818 的帖子6 u; L: h9 e; v7 ^

7 Q  X" W: L! l" o2 A6 J能请教你是用的什么培养基养脐带MSC吗？分化实验培养基是那种？分化时间有多长？3 d5 b/ j  O! S" j$ m" X

6 @2 T( m$ I, x4 j; M* o是不是不能用骨髓MSC 的分化方法？

henryjia

回复 coffee.cat105 的帖子8 y  t4 M% Q, g3 J/ J7 J
# k, X' L" r1 X* [
我至少试了三个样本，成骨成脂最长达3周。

henryjia

回复 老姜 的帖子0 K, X, f5 u7 d, H) H3 A' x
) j2 p. r/ u/ J3 W  W$ J$ i
我对文献持怀疑态度，不知道各位同仁有没有自己试验成功的。
# Y1 s  X# G0 \8 e' Y* E7 L
; p  c  s* s$ Q  F( V; I) W很想知道，是不是真的可行。唉，进展缓慢，急呀！

老姜

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. }. |: R3 d8 {# Y4 a. I" E1 s! X4 p% o0 b
分化培养液配方是文献常用的就行。培养液为ＬＧ－ＤＭＥＭ，血清是Ｇｉｂｃｏ澳洲产的。

老姜

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9 S. ?! U9 m2 h& D1 h" z脂肪诱导技巧：使用质量差的血清诱导脂肪分化相对快点，诱导约２０－３５天；
" I- L: y. `- ]* |成骨诱导技巧：避光！试剂，换液均避光，少在显微镜下观察，多个样本时只观察一个样本，诱导约２０天以上。

henryjia

& J" t% ?# E$ c3 v
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回复 老姜 的帖子: Y& ^, N8 x% v( T  Q% `
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您有没有用R&D现成的那种分化添加剂？4 k8 p* _6 I& D  M1 K/ O( b
1 h9 P- H5 r) d3 y4 f8 m
我做的可以观察到酯化液滴，但是很少。成骨很弱。1 v" I. H9 t# _3 r  r0 j

% O9 T% ^) L3 o( s细胞形态非常好，流式结果也很好。所以很郁闷。  y, j  y+ r9 u- e; j% K2 q8 x6 h
# ]  A9 {! U' R9 u
是否可以请教您的分化配方吗？
, |. Z* P1 V' j1 w8 d, s, [; o& N" Y
请您指教。多谢/ t' C( ~. R( p

weibin2002

干细胞会因为所处的阶段不同，诱导的条件和时间也有不同吧。骨髓的可以诱导成功，说明不是试剂的问题；可能诱导剂的浓度和时间等条件还需完善吧

老姜

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3 y1 o( r! P# ^5 Z% M3 W
- ]8 @, ^+ J; I- t7 j% d成骨诱导：５０μＭ的Ｌ－抗坏血酸；１０ｎＭ的β－磷酸甘油钠；１０ｎＭ的地塞米松；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；补足ＬＧ－ＤＭＥＭ（避光，临用前加地塞米松）．
5 u/ v8 Y' ^; w  Q  w成脂诱导：完全诱导液：０.５ｍＭ的ＩＢＭＸ；１００ｍＭ的吲哚美辛；１μＭ的地塞米松；１０μｇ／ｍＬ的胰岛素；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；维持液：１０μｇ／ｍＬ的胰岛素、每三天换一次液，第一次用完全诱导液，第二次用维持液循环三个周期，一直用维持液换液，直至镜下见脂质滴形成，为使脂质滴多点，可多养几天。

henryjia

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& _" r$ [& u. Z  Z9 b* J- K& [4 A  j( |8 P
多谢指教。