脐血分离的EPC的CD309表达量应该是多少？

coffee.cat105

          如题，现在在做脐血分离EPC，细胞形态看上去不错，铺路石样，增殖速度不错，3天长2倍没有问题，P1的血管形成情况也很不错，可是CD309的表达量一直就在10%以下，请问一下各位前辈这个脐血中分离的EPC的CD309流式表达应该是多少？会随着传代逐渐降低吗？我做了P1的，P3的，P4的，一直很低，但是看文献都在70%以上…………. O$ @! o$ @, J1 H

" B+ X/ ?: e6 A/ B& c9 `        有没有EPC做流式的protocol，急需学习啊。+ @  S- a0 K* k
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pailishi

你用的是哪个的CD309?什么荧光的？是否在保质期内？我们做的脐血EPC养到P2一般确实在70%左右，甚至到90%. I3 J) a0 M3 F( e+ D% a: q
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有可能是抗体本身的问题，你可以换一个其它公司的抗体试试

pailishi

你用的是哪个的CD309?什么荧光的？是否在保质期内？我们做的脐血EPC养到P2一般确实在70%左右，甚至到90%
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( q1 g* H- ~+ I# ?有可能是抗体本身的问题，你可以换一个其它公司的抗体试试

coffee.cat105

pailishi 发表于 2013-11-12 09:05
( H. _0 ?" r! v( W8 p& Q你用的是哪个的CD309?什么荧光的？是否在保质期内？我们做的脐血EPC养到P2一般确实在70%左右，甚至到90%6 \* @# w0 W- A, y# D# F

2 U+ T( l6 f5 b" n6 C ...

7 r  ?- o8 h8 j( K) G% n抗体是BD的，接的PE，才买的，还不到半年…………没有确实的证据说是抗体的问题领导不会让换抗体的啊，
: @) Y7 q  o1 {2 ~8 x& F" j# q# X! V+ |你们做的脐血也这么高吗？用的什么培养基，我用的EGM-2+10%FBS，消化是用Gbico的温和型的胰酶。

pailishi

BD公司，PE荧光，货号560872，培养基只用的EGM-2，脐血EPC

coffee.cat105

pailishi 发表于 2013-11-14 15:41 9 g9 c# P; U( f
BD公司，PE荧光，货号560872，培养基只用的EGM-2，脐血EPC

0 B4 q7 D  Y9 B7 n8 A: U抗体是一样的，你培养基只用EGM-2的意思，是LONZA的EGM-2，含2%的血清的那个吗？

pailishi

是的

coffee.cat105

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1 r' f, L* B; k( f
+ L  q. O) a/ A又折磨了两个月，中间有一次上到60%，后面又做不出来了，问了好多人，都说一直很高，不能理解我这个是什么问题，怎么办啊