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xcchao5855 wrote:7 l. h) ?2 M; a, M4 H
请教ven15和hardtc,用柠檬酸钠抗凝可以吗?有没有体会,最少需要多少脐血才够培养出一批MSC?培养体系中的bFGF是必需的吗?有没有人尝试过用CD133等磁珠分选后培养,是不是情况更好些呢?
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1 R$ v. ` `: M- j$ H* [7 v; z W1、可以用柠檬酸钠,不过要注意最终浓度5 C5 O7 _4 T8 L; C& S
2、脐血量50~100ml,胎龄越大,需要的脐血量越大4 {% J5 g/ \1 C% `' u
3、对于一般的培养基可以添加bFGF,可促进生长,如果是用的stem cell公司的专用培养基则不用添加
8 g& g f+ y, d8 E* @& D2 t4、磁珠分选比较理想,不过价格昂贵,不能广泛使用$ p( a+ Z, U/ N9 T0 h( p" q
3 \, @' Q# f9 S/ U& r t$ O1 F& |( `! q/ I3 C/ v* s
医坛小媛 wrote:
3 f" L4 [. R. Q& X请问hardtc 战友,您这用的明胶是明胶溶液吧,需要新鲜配置和消毒吗?大概要沉降多长时间呢?
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/ c% E2 ^9 W1 k8 P: A, c) N/ j* |1 O# I. h7 z7 u7 W# n( z
新鲜配制3%明胶溶液,高温高压消毒,沉降RBC60min左右。
8 a! v" {! T, l0 X* K: E1 ?: |% n: v8 i- t& o" j& ?
( ]! u# R Q; T& L
xujunjunyls wrote:
1 r' a* i2 W; e谢谢你的贴子 hardtc 天山玉玲珑 ,我用的是D/F12培养基,感觉细胞老化的很快,很容易死亡,请问你添加了那些因子,其中的含量是多少.另外培养液的选择是否很重要,国外文献有用IMDM.
X' Q$ h v& F" A! C. n1 a* u9 Y9 @3 C$ z: ^. N0 z
4 v2 K: y) p. J; I有文献记载,比较了几种培养基,发现商品化的间充质干细胞的培养基Mesencult TM效果最好,其它的也可以培养出来,只不过成功率低些而已% o" j4 l; X1 ~
9 v+ B/ U7 N& }4 L' x9 ]7 y" X/ L: Y ~) M# B! F
粘豆包 wrote:
4 ~ n* s) j+ V+ u1 y( h5 k7 v( D& |8 ~0 k胎盘里面的msc丰富么????
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, j1 s. }; n7 S4 N2 n' Z8 a: i1 N3 G
也有人做过脐血以外胎盘或脐带来源的MSC,认为胎盘、脐带或脐静脉壁来源的MSC更为丰富,不过做这方面研究的人不是很多。 |
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