脐带间充质干细胞原代培养问题

龙七

培养细胞在未贴附于底物之前一般均似球体样；当与底物贴附后，细胞将逐渐伸展而形成一定的形态，呈成纤维细胞样或上皮细胞样等。细胞附着于底物时并非一种需要能量的过程，一般认为与电荷有关。据资料记载，37℃时在2 min内细胞之间即可形成键，该键可对0.01%胰蛋白酶起作用且仅发现于细胞之间，而细胞与底物之间则无；8 min后才有稳定的键形成。' a/ b# r6 h" ~+ f. w' t: V; e
         一些特殊的促细胞附着的物质（如层粘连蛋白、纤维链接蛋白、III型胶原、血清扩展因子等）可能参加细胞的贴附过程。这些促细胞附着因子（或贴壁因子）均为蛋白质，存在于细胞膜表面或培养液尤其血清之中。在培养过程中，这些带阳电荷的促贴附因子先吸附于底物上，悬浮的圆形细胞再与已吸附有促贴附物质的底物附着，以后细胞将伸展成其原来的形态。一般来说，从底物脱离下来的贴附生长型细胞，不能长期在悬浮中生长而将逐渐退变，除非这是一些转化了的细胞或恶性肿瘤细胞。0 L( j/ h* l! y: |8 E. `
        组织贴壁应该是多个细胞贴壁的宏观表现吧

blackhei

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, \2 X1 C( D- z
谢谢，非常感谢，学习了

yj729506

换液的时候，如果组织块是粘附在平皿上的，但同时该组织块周围并未爬出，就有影响；若是组织块周围已经有成纤维状细胞爬出了，那细胞会继续增殖，则影响不大。. f1 K- ]6 P% f; T5 ?
还有，换液的时候最好小心一点，半量换液最佳，因为原代培养过程中，细胞在生长的过程也会分泌一些因子，有利于细胞的长出与增殖，所以保留一半原来的培养液还是好的。# }0 O5 y3 J. ^; K* Y* h5 b7 G' `7 K
以上是我的经验。

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2 N; F# Z0 D: I; e7 s+ t4 |! t% d3 a' q' O9 h8 Q" F) d' N& B
学习了

单倍体螺旋

这个帖子很好，最近正好在学习相关知识！

好雨知春

龙七 发表于 2017-12-11 13:44
5 q1 W* g- P% G8 ]1 j& x4 z' V培养细胞在未贴附于底物之前一般均似球体样；当与底物贴附后，细胞将逐渐伸展而形成一定的形态，呈成纤维细 ...

- t7 v" Q; z5 t% d# u

xph2557

换液换掉的组织块，会不会连细胞一起换掉,观察的有细胞爬出在它周围，换液之后细胞就观察不到，继续培养液没有增值，但是部分会有死细胞  是什么原因呢

uu小火车

干细胞贴壁生长，小的组织块脱落影响不大