大家帮我看看我的细胞里面有没有小鼠MSC？前天晚上取的原代，今晚全部换了液。

tanhehe1006

回复 4# angel-sakura 6 I. g; G# P7 \0 E4 ^

. w$ K" J. J+ e$ M) ~8 h+ G; x+ G% f) b$ K3 {7 _2 d
    我用的是骨片分离，想得到干净的骨片很容易，因为我前期做骨骼肌干细胞的，最简单的方法就是先用眼科剪尽量去除肌肉组织。之后用手术刀片刮骨，很容易去除筋膜和肌肉的。去掉干骺端。这个实验一定要好好冲洗髓腔

mahong_ok

血细胞太多了，需要的细胞很少

jisuyun

血细胞太多了，需要的细胞很少
" P, i9 Z4 H! m9 x- {mahong_ok 发表于 2010-4-23 14:08

0 R1 M. z9 s/ Q2 v& d) R, j0 S2 ]1 w  `9 P" ~* L( B

; z: v& Q! G7 f' R: z9 C7 O有什么办法下次做的时候让血细胞少点？3 i) O; W4 V. C! O1 D$ F+ D
这次的细胞再过几天换液比较好？

angel-sakura

回复 13# jisuyun
# x4 H8 M) Z7 D- o先不要怎么急着换液吧，刚从体内移到体外，环境变化很大，如果太早移走其他细胞的话可能会不利于BMSC的生长和贴壁，因为不同细胞之间存在着相互作用。我导师建议我4~5天再换液，此外，分离出的BMSC接种的时候最好细胞密度不要太大了，以防杂细胞太多占位效应抑制BMSC的生长，细胞生长是需要空间的。不过个人认为应该根据实际情况来判断是否换。

jisuyun

我们的摇床怎么只有转速，不能恒温。
) Y  C( f$ f6 I+ x+ u放在室内二十多度可以吗？
7 }) M! s! y  V5 B/ f- V+ a我上次的那个圆圆的细胞渐渐飘起来很多，梭形的细胞越来越多了，很开心。离上次全量换液又有72h了，要不要再过两天再换？: S, e+ b, |1 w* u+ @( b  e* A
如果可以，晚上放图片。

tnfsf10

你的照片中还是可以看见一些贴壁细胞，有点纤维状。一般来说，48小时可以看到了。
" T, F* L' t2 {6 a0 [! N就是贴壁细胞比较少。

kqyy

目的细胞很多的 ,集落也出现了,一般初次换液后生长会很快的.恭喜你>

jisuyun

4 `2 e' ^. Q0 A; i) Z( d4 q3 D
# Y$ d* i' E8 u. ?2 R  J
今天第14天，本来想半量换液的，没想这么早传代。可是大脑开小差一不留神把培养瓶口多烧了几秒钟，瓶口立即严重变形。好心痛，一时之间不知道该怎么办。
3 z/ ?9 W$ S! N) m匆忙之中赶紧融化胰酶预热PBS，先用GIBCO 0.25胰酶+EDTA消化约3分钟，放到1瓶里，消化完忘记吹打，只是摇了一摇，发现瓶子里还有约40%细胞，现在想想如果吹打一下很多会掉下来。于是再把剩下的又加了胰酶消化3分钟，又放了一瓶，想看看2瓶以后长的有什么区别。最后再看原来的瓶子几乎没有细胞了。' Z6 ?5 W: x, m* H5 u* }
传代时间会不会早了点？以后几天换液呢？全量还是半量？

why121

我按照书上所说24H半量换液 然后2-3天全量换液 这样行嘛？请指教