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养的AMSC出现黑点 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-11-22 10:59 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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养的细胞刚到前几代就出现细胞核周围很多黑点点,也不想污染的样子,是细胞老化,还是?头疼啊!好像还有一个细胞核中有两个细胞核!
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沙发
发表于 2010-11-22 11:42 |只看该作者
一个细胞核中有两个细胞核,应该是因为细胞在分裂和增殖吧,这个关系不是很大。但是你说的黑点,我养的细胞中也有,传代次数较多的时候会出现,再就是培养基用国产的时候也会出现,进口的a-MEM就会好很多。
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藤椅
发表于 2010-11-22 21:31 |只看该作者
我觉得是支原体污染,这种黑点以前一直以为是黑胶虫,但我们实验室一直都是保证国外进口血清,都是老板亲自从美国带回来,最近一段时间也发现有,黑点多的时候瓶底感觉像铺层沙子。支原体污染特点就是细胞增殖缓慢,早期根本看不出来,培养基不浑浊,你可以做下鉴定,用染色方法Hochest染DNA,如果有支原体细胞核上也有小亮点,周围也全是小亮点,细胞边界不清。如果有精力可以做专门支原体PCR鉴定,这个最可靠。可以试下庆大霉素和环丙沙星,SIGMA,INVITROGEN都有专杀的试剂。
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板凳
发表于 2010-11-23 09:33 |只看该作者
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回复 3# feifei105
0 M: R9 l6 c$ t' H& U请问如果加庆大霉素的话,量怎么控制?

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帅哥研究员

报纸
发表于 2010-11-23 09:54 |只看该作者
我觉得与血清也有一定关系吧
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地板
发表于 2010-11-24 07:49 |只看该作者
传代  试试看  一开始的几代 都这样的  看起来不太干净  越传应该 越干净 透光度越好
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发表于 2010-11-24 17:12 |只看该作者
感觉那细胞的代次较高,细胞已经老化了
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发表于 2010-11-27 17:48 |只看该作者
我的细胞现在传到第十代,也出现了这样的问题。在高倍镜下可以看到黑色小点做布朗运动,到底是什么我也不是很明白。有人说是支原体,有人说是黑胶虫,还有人说是球菌。建议大家培养一瓶全培养基,如果是血清或培养基的问题就好说明问题 了
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