脂肪干细胞

lizzy_81

组织消化一般37度，1小时左右，200rpm振荡。但是放到振荡培养箱中还要每隔15分钟把管子拿出来晃着混合一下，以使胶原酶和脂肪混合充分。

天枰2012

如果用水浴振荡，消化40-60min就行了,要是放在培养箱里，最少要消化2h

     请问消化时间是怎么掌握的，有没有客观依据，或者消成什么样的时候就可以了？谢谢

荷荷

37度，220rpm的话，半个小时就可以了。消化的比较好的话可以看到组织呈糜状，且静置5分钟左右即可出现明显的分层。

deshenglll

看看。学习学习

Demon_CN

首先取得的细胞少，就要从你分离的方式入手：
2 @# a, x" V0 \: K  R0 T1、一般抽脂的时候需要把脂肪颗粒打碎，方便消化
8 y, \. Y- g, ?- _2、向有脂肪组织的试管中加入与组织量相同大约5ml左右的消化液（胰酶，I型胶原酶，以1：1比例混合配制而成），将试管放入37°C恒温摇床中震荡消化30min。出现分层上层为黄色油状脂肪细胞层，中层为脂肪组织层，下层为含脂肪干细胞和一些其他杂细胞；
- h2 A: G3 O- [7 ]% N3、取最下面一层细胞，（有时候脂肪颗粒大，需要再消化，这个个人掌握)加培养基再离心去胰酶什么的。
9 F3 n7 k# v" B  {4、计数接种
# m) P# c% p2 J0 R$ @培养基的话，我以前用L—DMEM+10%FBS效果不错

493512112

下载不了的东西 请不要给予上传还行啊  浪费人的宝宝

avbn

) Y% b! D6 S4 v+ p5 r

/ e9 P. y6 w( r还要注意接种的密度，如果太少了可能会长不起来。 一般是20000/cm2