MEF的条件培养基可以保持小鼠胚胎干细胞的全能性吗

mayiwaiwai

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' A: t+ g! a% q* X' P# e. v9 H' V. `0 C& E- \/ A
同学可给出你用的培养基成分吗，我也想用饲养层试试养干细胞，做增殖。方便的话可以发下你的protocol吗，

mayiwaiwai

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3 L0 L- a# h3 D- U; z. M& n# V1 w9 L( y
请问什么是MEF的条件培养基呢，如何制备的，

lipenix

原来的MEF用完了，本周四我会重新做MEF，届时我会每步拍下照片，再写个过程发上来，可能要几周吧。

细胞海洋

回复 lipenix 的帖子- V" |: W: O! m/ t% r3 V% r
2 K/ ^8 ?5 u0 a; K$ s
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样- q, \& k8 O& J+ c! {4 y

# \# U: e) ^4 d0 r! p5 y否则他会看不到
6 z; p- E2 z. k: g! V. N

细胞海洋

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+ T2 o$ [% V! e: v
  O/ s9 ^2 T& Z; l# e+ \看13楼

shangchunhua

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$ L/ W3 r1 M- @4 ?: @
( ?) G6 j; w* P; H) ^* m3 E, P/ k& ?就是用培养过MEF的培养基用来饲养ES细胞，制MEF-conditioned medium
+ p" {4 B1 m6 d+ O5 L6 Q3 }  o备方法如下：将灭活的MEF接种到铺有明胶的培养皿中，第二天换成mES培养基，24h后收集培养基，离心后用0.22um的滤头过滤除菌。按照上述方法收集七天条件培养基，储存在4℃冰箱备用。
; q7 U/ d$ s( u( A, G

littleeley

我们实验室用的无MEF小鼠ESC培养, 0.2%明胶包被细胞培养板
5 q' y, q3 ]" i- T" K% B/ e" c培养液: DMEM, 1 mM Sodium Pyruvate, 5% FBS (Invitrogen, 30044-333), 15% KSR (Invitrogen, 10828-028), 0.1 mM NEAA (Invitrogen, 11140-050), 0.1 mM β-ME (Invitrogen, 21985-023), 2 mM L-glu, 10 ng/ml LIF (Chemicon, )# K. F- u$ @1 H
细胞绝大多数保持不分化，可满足基本实验需求。

卢小小

很好很有帮助

卢小小

想问一下，dmem的货号是多少呀

wbj1983

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9 \% `" K1 e/ d! |& D4 f
0 t) J* W! s, m答案肯定是否定的，因为小鼠ES要依赖LIF，如果培养基中不加LIF,ES细胞会分化的！