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请教,间充质干细胞在肝硬化等疾病的应用。 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-11-22 09:51 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
由乙型或丙型肝炎引起的肝硬化,可以用自体的MSCs做治疗吗?( m3 h- [' Y3 p/ V! Y( L/ d
如果可以,治疗方案该怎样制定?& u1 y. c  z! {3 ^
谢谢!

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沙发
发表于 2011-11-22 11:08 |只看该作者
不行吧,北医有一篇文献内容大概是在肝硬化的过程中间充质干细胞扮演很重要的角色。文章我一下找不到了。大概是2007年的!
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藤椅
发表于 2011-11-22 11:15 |只看该作者
我看过一篇文献,说病毒性肝炎引起的肝硬化患者的MSCs的特性较正常人的低。
. l. r# [/ E  F$ M( ^4 o$ c不知道你们是怎么做的?
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板凳
发表于 2011-11-22 11:48 |只看该作者
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我也看过关于MSC会引起肝硬化的文献,但是我觉得这个主要是看MSC治疗肝硬化的时机,如果在形成期有可能会促进肝硬化。
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报纸
发表于 2011-11-28 18:43 |只看该作者
建议相关研究多看看302医院王福生老师的研究成果,王老师在MSC治疗肝硬化方面有些不错研究,目前国内在clinicaltrials.gov上注册2项MSC治疗肝衰竭或肝硬化的临床试验就是由他们实施的。
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地板
发表于 2011-11-30 22:14 |只看该作者
可以的呀 国内外都已经有相关的临床研究。# d6 L9 T6 x7 r) u$ J- _7 o
今年10月份中山大学附属三院的高志良教授和他们的研究小组在HEPATOLOGY上发表了一篇文献《自体骨髓间充质干细胞移植治疗乙肝所致肝衰竭的短期及长期疗效》。我们论坛上之前也有过他们研究的分享,感觉高教授他们做得非常棒,再次跟大家分享一下~! B9 ?  n( x# m
骨髓间充质干细胞作为治疗细胞,其具有以下优点而广泛用于细胞治疗:易于分离和培养;较强的增殖分化能力;独特的免疫调节作用及移植后副作用较低。自体骨髓干细胞移植时,因骨髓间充质干细胞取自患者自体,故避免了免疫排斥的可能。1 ~$ x: m# c' e: W# s
高教授的研究方法(翻译自上诉文献,希望能对你有所启发):
1 r& s+ W' h3 ?: P" Q研究人群 2005年九月份至2009年六月在我科就诊的527名乙肝所致肝衰竭病人均接受药物治疗,主要为保肝、降酶、退黄及白蛋白支持等对症治疗,药物治疗一周作为研究起点。
- o7 E' i. ^+ O6 q入组标准  1、年龄在15-75岁之间;2.签署自体骨髓间充质干细胞移植知情同意书,并自愿接受干细胞移植治疗;3、诊断为乙肝所致的肝衰竭。诊断标准:乙肝诊断标准为美国肝脏疾病协会2009年制定的慢乙肝防治指南(发表于hepatology);肝衰竭诊断标准为亚洲及大洋洲肝病协会2009年一致通过的肝衰竭诊治指南。
0 H  z) G' E5 P! q: ]. S 排除标准:1、孕妇及哺乳期的女性患者;2、术前6个月内接受了抗病毒治疗或免疫调节治疗;3、存在其他可以引起活动性肝病的因素(如自身免疫性肝病、药物性肝损害、酒精性肝病及遗传代谢性肝病等);4、伴有HIV感染或先天性免疫缺陷性疾病;5、有肝癌或其他恶性疾病;6、严重的糖尿病;7、自身免疫性疾病;8、其他重要脏器衰竭(如肾衰竭);8、伴有感染症状(如出现发热、白细胞或淋巴细胞增多、有腹部、胆道或肺部感染);9、有其他严重的并发症(如肝性脑病、消化道出血等);10、不能耐受上述药物治疗;11、已经接受或即将接受人工肝或肝移植治疗的患者。3 I- E+ Y/ {+ @: Z, S
分组及亚组 评估病情后,向患者介绍干细胞移植的可行性及风险,共有53名患者签署知情同意,并进行骨髓干细胞移植,即为移植组 A组;与其年龄、性别、肝功能指标及MELD评分具有可比性的有105人。设为对照组,B组。. E' y1 g2 c0 C6 D
每组人群再根据是否伴有肝硬化分为两个亚组,即A1组、A2组;B1组、B2组。% b7 v) t" t) n6 Z5 O
方法 1、骨髓间充质干细胞的采集、分离* ]6 m: N! m  w5 ?; g# k$ l
移植组患者在接受1周的药物治疗后,在严格无菌的条件下,以髂前上棘为穿刺点,抽取骨髓100-120ml;在无菌的细胞培养室中利用密度梯度离心法进行分离,用生理盐水稀释骨髓后,缓慢加入等量的percol分离培养基,在离心机中以2500转/分的转速离心30分钟。分离得到单个核细胞,并用10ml生理盐水冲洗3次。收集细胞悬液并保存在10ml生理盐水中,其中0.2ml接种在含有10%胎牛血清的L-DMEM培养基中。从100-120ml骨髓中分离出的单个核细胞的数目为3.4+—3.8×10的八次方。
5 a2 I& f! I- K         2、骨髓间充质干细胞的培养及流式细胞学检验其表型
- f* [+ o: s& h+ }: i* K! K将0.2ml的细胞悬液在37摄氏度的环境中置于25平方厘米的培养基中进行培养,三天后进行换液,以后每两天换液一次。当有70-80%的细胞融合后,用0.25%的胰酶和0.1%的EDTA液消化骨髓间充质干细胞,并以1:2进行传代。将第三代细胞进行消化后,并用PBS液冲洗,并以1.0*10的六次方的密度生长。' g- d- a4 c7 h
用流式细胞学方法检测其表型。3 L6 X& p' v/ V* ~

4 Q9 r! ]. _5 y2 r% m) A+ r: t         3、自体骨髓间充质干细胞移植
9 }( z: \7 e$ ^. M1 l干细胞移植通过介入的方法在手术室中进行,在心电监护下,穿刺股动脉、穿刺管并通过腹主动脉、腹腔干及肝总动脉,最后将管子置于肝固有动脉。在20-30分钟内将干细胞悬液(存放于10ml生理盐水中)缓慢输注至肝脏。
' H* x" W7 I) d8 f: t         4、观察指标及随访
4 {9 W- x/ M( r  s, _移植组和对照组的平均住院日分别为 29.27 +—31.34 和30.68 +—35.29 天,将住院期间定义为短期,即1-4周,4-192周为长期。 # F/ c, n' O+ ?3 D! x/ n2 T$ D
在移植后1-4周,每周进行一次随访;移植4-192周,每12周随访一次;
; v. J0 z8 x$ ?/ \& g8 o观察指标主要有:1、观察并记录移植后的成功率、副反应及并发症;2、在短期内观察临床症状,如食欲减退、腹胀、疲劳;3、肝功能指标:ALT、白蛋白、总胆红素、凝血时间及MELD评分;4、肝细胞癌发生率及死亡率。
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