请教大家一个问题：如何在让细胞增殖的情况下还能保持其不分化

jack063@163.com

机体的免疫细胞和非免疫细胞能合成和分泌小分子的多肽类因子，它们调节多种细胞生理功能，这些因子统称为细胞因子（cytokines）。细胞因子包括淋巴细胞产生的淋巴因子和单核巨噬细胞产生的单核因子等。目前已知白细胞介素（interleukin,IL），干扰素（interferon,IFN）、集落刺激因子（colony stimulating factor,CSF）、肿瘤坏死因子（tumornecrosis factor,TNF）、转化生长因子（transforming growth foctor,TGF-β）等均是免疫细胞产生的细胞因子，它们在免疫系统中起着非常重要的调控作用，在异常情况下也会导致病理反应。MEF一旦长满，必须用丝裂霉素C或δ射线抑制其分裂。
  [% w  I' V, Q4 B丝裂霉素C抑制有丝分裂0 S1 G) ]: Y8 u* H9 V/ ]" E' N
用MMC处理培养皿，吸出培养液15ml/皿，加到50ml离心管中，加入适量MMC使终浓度为10μg/ml，混合溶液，弃掉每个皿中剩余的5ml培养液，将离心管中含MMC的培养液回加到培养皿中，15ml/皿，37℃孵育3h。: X1 V  b/ n& E2 m3 M2 _# v
预温MEF培养液和0.05%胰酶到37℃，向50ml离心管中加入20ml预温培养液（3皿/管）。/ f) ^- @6 [1 F" p% n+ [
从孵箱中同时取出3个皿，弃去培养液，用1×PBS 5ml洗1次，加胰酶5ml/皿，让细胞漂起，吸到离心管中，用5ml胰酶洗三个皿，同样加到离心管中，最后用10ml新的预温的MEF培养液洗一次，加到离心管中，用计数板计( T- w1 M, a. Z9 p+ N  ]
数细胞密度，500~600×g离心（继续传代和冷冻）。
' a" {9 Z% T, B) }3 }+ Q

scienese

回复 天枰2012 的帖子+ K. i- y: m  t' P( |
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我要是加了bFGF的话形态就变了，所以不能加bFGF

YYQ6301

鼠的加LIF，人的加BFGF

scienese

回复 YYQ6301 的帖子5 }1 j" J4 h3 Q7 h2 h3 K( i2 k1 K8 c

% t8 C; @6 k: ~; m这俩都不是！我处于摸索阶段