关于干细胞分选

April-ming

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        各位前辈好，我是刚接触肿瘤干细胞的，现在想对MCF-7细胞系的干细胞进行分选，并且分选后要分别继续培养，看了很多文献，主要有SP功能分选法，FACS荧光激活细胞分选法，磁珠免疫分选法以及无血清悬浮培养法，想请教各位对MCF-7来说哪种方法更成熟些，，或者有哪位前辈之前做过分选，求指教~
0 k6 p0 P: a1 ^- z; ?现在真的一团糟，看了一堆文献，总结了一堆，然后发现越看越乱

刘慧瑾

荧光流式分选最靠谱

April-ming

回复 刘慧瑾 的帖子. A; R+ x$ E/ V+ X* q- X! D
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谢谢，那请问你有做过吗，用的什么染色剂

zb_ming

悬浮培养法最经济实惠，而且不麻烦。培养后可以把细胞拿去鉴定。

maiweiqian

回复 zb_ming 的帖子
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悬浮培养我出现的情况是很难大量收集，因为成的球不是很多，然后做下面的免疫鉴定就不够细胞数目了，请问前辈有没有出现这个情况？前辈有没有发觉成的球很容易聚集成团？

zb_ming

首先，成的球不多一般是因为细胞状态不好；其次，成的球聚集很常见，要想避免或减少这种现象，就要轻拿轻放，尽量减少细胞晃动。3 j( f5 f' P0 u6 i" n2 D% T9 V! m

April-ming

回复 zb_ming 的帖子  ]! z/ U+ H& N7 W4 @$ A
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可是我看到有人做的说在培养过程中每天晃动数次以阻止细胞贴壁，这是怎么回事？

zb_ming

悬浮细胞不贴壁，贴壁要么是分化了，要么就是细胞出状况了。

fdgg012345

# w9 k$ ]0 w7 A( q: E. f( i0 |/ Y+ s
+ D& \7 f  N4 S  ]8 nFACS不错，既能测定又能分选，不过要求流式细胞仪所在的环境是无菌的，不然分选后基本就污染了。sp法应该也是通过流式分选的吧。磁珠也不错，不过成本挺高的。