NK扩增遇到的问题，求解

Liyun65

最近在筛选人外周血NK细胞扩增的方法，遇到一些问题。不知道大家养NK细胞种的细胞浓度是多少。
3 x0 u, L! i6 L- \目前遇到的问题是：0天分离PBMC，然后加入OKT3、IL2、IL15第4天离心去除OKT3。但是，第4天观察到细胞结团了，却没有增殖，细胞很小，不知道是不是细胞皱缩变小了，还是死了。

gondobar

细胞皱缩变小？我很好奇！养NK加OKT3，我也很好奇？文献确是有，但是OKT3对T刺激作用很强，如何保证NK纯度！细胞培养，尤其是这种复杂细胞，扩增前几天细胞变少是很正常的。

honey棉花

NK细胞成集落生长，刺激比较好的细胞教未刺激的偏大，在前期培养细胞总数会有所变少，但在后期会大量增殖。
* t) }/ e/ M; ^" J" f$ [你可以取部分细胞做个台盼蓝染色，检测一下细胞的活率

ltickp

NK体外培养会有细胞结团的现象

伊诺强

你这个培养体系本身就有问题，我估计是不会成功的。纯因子刺激的NK细胞培养还是有一定的难度的，各家多少有些区别，但是可以肯定的是你这个体系估计不行

sky512829

进来学习培养

xieyun20052005

体系很重要，体系不对功夫白搭

Liyun65

回复 伊诺强 的帖子' H7 b  e( A) U4 m6 V+ c/ g+ w, `) N

, `) U# Y& N% Y$ Y' ]6 L9 _$ X不知道你们是怎么样子做的呢？

liuyanly35

OKT3是养CIK细胞的。不是针对NK细胞的 。

lihaifeng

第4天没有增殖很正常，你这个体系估计5到7天才会增殖。细胞成团代表他将要增殖，可以再观察几天再说。