求小鼠12.5dpc雄性生殖脊消化成单细胞，多少能达到10^8？

chenchunlei

   同题，谢谢

hcluo

请教一下楼主，生殖脊细胞是如何取出来了的啊，需要如何饲养？谢了！

chenchunlei

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( C) i' L) @4 ]( d1 d不好意思我没培养过生殖脊

yangpan521

1.首先，从见栓那天开始计时为0.5d,12d后取孕鼠颈椎处死后，剖开腹腔 取出胎儿（一连串的）放在培养皿内 。
6 Z) G: C* i" M$ ?, ?2.在超净胎内用75%的酒精浸泡1min,然后用生理盐水清洗干净。
) k% j, W& B! e& G. m9 A1 x& j5 m8 `3.用无菌的镊子慢慢剥去胎膜、胎盘等暴露出完整的胎儿。8 \- \+ Y( @3 o' p' ^! G+ I  o. X
4.取一新的培养皿，放入生理盐水或者DPBS（含双抗），将胎儿放置其中。
5 r8 H( r7 }3 _4 L) {5.在体视镜下，用两个油丝镊轻轻分离生殖脊，胎儿很脆、已破碎实验应很小心，胎儿的腹部有点红色（为内脏），找到肾脏，紧挨着的就是生殖脊，
8 ]1 I6 ]! D5 Y$ D12.5d的胎儿生殖脊彼此挨得很近，呈长条状，雄性外观可见里面呈条纹状。2 A9 C# R& |9 k
本人的实验，仅供参考。

xiangchou812

yangpan521 发表于 2012-4-6 09:22
( ?2 S$ H. P$ `3 T0 g1.首先，从见栓那天开始计时为0.5d,12d后取孕鼠颈椎处死后，剖开腹腔 取出胎儿（一连串的）放在培养皿内 。 ...

6 h. U, q" G1 P/ l% z。赞一个！！！！

hcluo

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$ S4 V; J; E% T( }5 f6 q. G1 \* q  o* C( n+ S1 A8 U- Y
谢了啊，生殖脊与肾脏有颜色区别吗？有图吗？

yangpan521

今晚我传上照片给你看看吧

chenchunlei

回复 hcluo 的帖子  E( C7 A% g, _) S9 S

. S) [% |. c3 S6 v小鼠胚胎操作手册上有

hcluo

回复 yangpan521 的帖子. _# U& h+ Z, c6 t5 |2 O

, S( r, y& X2 R好的，谢了

yangpan521

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# E- _  s# y/ K3 E$ S% U. Q
/ V8 G  q+ Y+ O今天实验室的电脑出了点问题，图片没考出来，明天我再试试，不好意思了