小鼠骨髓间充质干细胞鉴定的问题

signext

昨取原代培养后21天传代到P2生长到约80%的小鼠BMSC
& f6 M! J6 f6 ~' f4 E; }6 @提总RNA，反转录，PCR/ k4 q* H. E/ K; U# b- A5 A- A  R
分别是  U6 L$ o) {: ]
GAPDH++/Fibronectin+/CD29－/CD34－/CD45+/CD90—/ j0 H! c2 w! l9 i/ t7 E" V" ]. V# r3 O
还没有做流式
5 a% F0 s8 @: l7 \3 v3 P% B! ^8 c
" @* Y0 z/ m' ]( s这个结果能证明我的细胞是或者不是BMSC吗？. e, R0 Z" G% `; _% g+ C. ^  O
可不可以暂不做流式先进行下面的实验呢？

king8

首先，原代培养的时间是不是太长了点，
4 [  t. }8 X) k, d1 \% j' E这样可能会有出现分化。
; N! i/ r) P. `# E1 X: d结合你的结果，流式结果可能也不会很理想。/ u& ~- k' W% @! {! S7 K6 n7 P0 W
建议先养好细胞，否则后续会浪费大量功夫。# [8 H" E) P& Z% Y5 }1 [
根据自己的些许经验：最好做个成体倍增率，) n5 \  b/ i4 R
小鼠BMSC流式结果为CD34、CD45阴性CD29、CD44、CD90、CD105阳性

zhanglei1414

先把细胞养好，直接上流式，这是最简单的方法了

signext

king8 发表于 2011-12-16 22:41 3 o1 m1 {# |5 d$ `
首先，原代培养的时间是不是太长了点，
6 l6 }; e6 b( F  S6 _) O这样可能会有出现分化。4 T, A- ^7 l9 V- O8 T
结合你的结果，流式结果可能也不会很理想 ...

! a( a6 ?( Q% N
非常感谢您的指导！

signext

培养了好久了，总是不得要领; F# m) {2 T, ?( o+ \6 U
很愁毕业啊