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本帖最后由 cc1986 于 2010-10-30 22:35 编辑
) A/ G8 b6 O- \7 F7 D
: T8 _7 V& p& c3 t3 Y( ]我是在养人的骨髓间充质干细胞,养的也不是很好，楼主的问题也经常遇到，谈谈失败的经验吧
* c% }. v$ L& [7 Y9 u0 o* @! T5 j6 t首先这种宽大扁平的细胞是什么细胞，有文献提到间充干培养过程中会出现典型的梭形细胞和扁平的细胞，两者都是间充干，都具备间充干的基本生物学特性。但是这种扁平的间充干是由梭形的间充干分化而来，只是增殖能力差一点。我培养的过程中会出现一些扁平的，但是比例不大，而且等细胞长满就没那么明显了。, y& @8 S" K& c& Z, d3 c+ z
其次 出现这种形态的细胞总归说明培养过程需要改善，首先你的培养基和血清最好是进口的，低糖DMEM+胎牛血清用的比较多，但是效果理想的却不多，尤其是针对骨髓来源的。实验室老师建立加一些抑制分化，促进增殖的细胞因子。当然有条件用专门的间充干培养基，很贵，但是看有人用的效果好很多。还有就是换液规律，传代时间，消化时间要短，接种密度适中等注意。下面的文献里面有提到一些改善措施，如接种细胞密度，细胞因子等。5 }: s' t/ T T6 X+ Z4 ~$ ^
最后昨天看了另一个实验室培养的脐带间充质干细胞，也是低糖+胎牛血清10%，培养了15代才出现一点点状态不好的迹象，而且细胞增殖明显比骨髓的快。同样是间充干，差距咋就这么大呢。当然文献报道有说脐带来源地是增殖和分化能力好，当然个体差异性也是有的，有的样本的脐带间充干也是长的不好。
/ q' ^9 X' q9 u, b说了这些，感觉没啥能帮上的，希望高手同样指点我一下，赶紧把骨髓间充干养好
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附几篇间充干培养方面的文献，希望对大家有帮助。
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发表于 2010-10-30 10:56
发表于 2010-10-30 21:08
