饲养层细胞射线灭活方案？

mecol

准备用X射线灭活CF-1小鼠MEF细胞，目前从文献上查到总量是40Gy，但是不知道具体如何操作。我们医院使用的是通常肿瘤病人的放疗仪器，求教有类似经验的朋友，该如何做？譬如，细胞的处理及量，一次给与的射线量，等等
1 G4 H9 u& S3 _% b+ S# Y, @5 F) c+ V拜谢！

zhusealin

将细胞全部收集到50ml离心管中，30Gy辐照

scottist

X射线没听说过，Gama射线的剂量如下：如果用的是钴60，处理MEF的剂量选择20-25Gray，有的地方如复旦大学放射研究所用铯137，用的放射剂量为50Gray。MEF生长到80%-90%，就可直接辐照处理，瓶数没有严格要求，仪器中差不多能放下就可以。

xbpy

总去放射室太耽误人家工作了，请问药物处理多少时间，多大剂量好呢？

mecol

回复 scottist 的帖子8 _' q9 v) u8 s

: j$ ~0 t0 r9 ]% }能一次就使用20-25Gy的剂量吗？那细胞岂不是都放死了？能不能具体点呢？

mecol

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+ z* ^; P9 |8 ?; h' O9 _8 h8 L0 j& @" k9 m2 L" c
谢谢！能具体点吗？

mecol

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% N, D, j) E% g6 K: h3 E, o  H2 l& @; {5 I
收费的，但是效果很好。丝裂霉素C处理2-3h即可，工作浓度10μg/ml

shihuijunm

X射线一般是80KV，辐照30min，将整盘（10cm dish）细胞摆在X 射线辐照仪里面照就可以了，辐照结束后，消化细胞，然后冻存或者直接使用。  m7 f4 i/ ~' u& a

9 [3 X+ ?/ W  L' o, ^0 B2 W: ^补充内容 (2014-10-24 14:38):
, S0 t# P$ G1 L$ f5 ^( b同济大学医学院6楼可以X射线辐照

xbpy

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* i) E$ G3 D0 S6 y2 ~% v/ j7 k8 ]) v' G# \2 T0 g5 j2 Q6 v
多谢回复。前几天用药物处理后做了一个上清实验，看看处理后的细胞在第1~7天什么时候的上清更有助于肿瘤细胞的生长，结果基本没啥效果，还不如普通培养基呢，不知怎么回事。而且10ug/ml3小时处理后的成纤维细胞，传几次2个星期了还不死。:dizzy:

mecol

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: d2 O% f2 `1 Y) v; d: u; C, o/ ^0 t. e; Q( b2 u1 Y
一般用1周