有关干细胞的标记问题

风自在流年

实验拟对注射到动物体内的干细胞进行标记，以期观察其分布等特性，请教一般用什么，周期较长，

watchen198891

一般GFP标记吧，观察的时候比较方便。

Jonathan

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要看是要活体跟踪还是杀了做切片。GFP活体是跟踪不到的。

屋檐上的乌鸦

活体追踪可以用纳米材料~！这个还是蛮方便的，随时都可以检测！

yinfuhua

回复 风自在流年 的帖子3 S5 {4 p9 R9 t: K
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可用CFSE（5- or 6-(N-Succinimidyloxycarbonyl)-3',6'-O,O'-diacetylfluorescein   羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯）。CFSE是一种活细胞荧光染料，可自发的不可逆地通过赖氨酸侧链或其他可利用的胺，偶联到细胞蛋白质上。经过最初的一段平衡时间（24h），CFSE标记的静止细胞的荧光可在长达几个月的时期内保持稳定，并且可以利用流式细胞术在488nm激发光和520nm检测通道进行分析。荧光染色方法简单易行，一般的细胞培养实验室都可以完成。染色效率高，可以保证细胞的阳性率。有看到文章用此荧光剂标记活体细胞进行体内示踪，效果不错。

风自在流年

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我确实是需要做活体，那请问活体一般是用什么标记呢，谢谢

风自在流年

回复 yinfuhua 的帖子7 I( n9 z7 S& e% b* L( J

# A; y3 N. @) |3 S谢谢你的回复。你的意思是这个可以进行活体成像？但是荧光染料不是随着细胞的分裂其信号会逐渐降低吗，我需要做6-9个月的实验，不知这个是否可行

风自在流年

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你是指超顺磁氧化铁这一类的吗，我的实验大概需要6-9个月时间，文献上查阅发现这一类的标记时间不太长，不知道是否可以。谢谢你的回复

yinfuhua

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做过小鼠脾细胞标记，3个月应该没有问题。你可以再查下相关文献。

Jonathan

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他那细胞不行，一般做细胞系都不能用CFSE，而且其毒性不知道。CFSE适用于短期染色。他这个实验最好转luciferase。可以稳定追踪，到时候测信号强度