关于间充质干细胞培养时使用的fbs的问题

eric1993

我们实验室使用FBS培养脐带间充质干细胞，可是灭活后的FBS中的沉淀一直都离心不下去，会悬浮在离心管中间，目前使用的是3500转（2465N，离心机上线为5000转），30min，升降速为500（离心机上线为600），请问大神们有没有什么解决的办法啊，谢谢

yingfeixiang

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+ s* I% t  u8 Q# O) P8 ], S* I7 q0 B1 a0 _" R  B/ Z7 E: Y: D" H
不是，这个需要灭活吗？

eric1993

回复 yingfeixiang 的帖子. M: J, U& C# e
9 B7 e) y, ~- l* P
我看有的文献上说国外进口的高质量FBS不需要灭活，但是国产的大多数还是建议灭活后使用的，但是灭活后其中的沉淀却无法离心下去，目前也找不到别的方法去除沉淀

yingfeixiang

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+ v3 v  z- B6 @/ H7 f9 A8 m8 ^: o1 T& O0 U% d4 E, }
啊，国产的需要呀。我以前离心去除沉淀很好去呀，2000rpm可以了，没看到你这个问题，在中间的是丝状悬浮物吧，可以使用前有0.22um针式滤器过滤。

eric1993

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, t- V2 Z' S0 V3 v3 r7 N
+ s, u- h  I, t+ [# z6 {. @我用3500都不行，而且中间的不是丝状的，考虑过用过滤的方法，但是FBS里的蛋白会堵塞滤膜，有可能是实验室的离心机的原因吧。。。

Dunncao

弱弱地说，离心不是计转速而是离心力啊。。。
: K  c5 I; K/ E% U中学物理，离心力跟旋转半径成正比，相同转速下，转子越大离心力越大啊。所以如果离心机太小，5000转也不管用啊。
& B2 a# u$ _4 i* F2 O: p- g% Y

eric1993

回复 Dunncao 的帖子$ k  @% D  M. V

1 F* x$ ^9 {; j' w+ z/ j! b5 x! r# ~实验室用的是安亭TDL-5C的离心机

Dunncao

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  c4 t" g% \0 f; M1 p& j' K5 ^* X# o+ L2 K& s# t
用的是多大的转子呢？找到转子数据，或者动手量一下转子半径，算一下就知道是多大离心力了呀。我用的16cm的转子，也要上到3000转以上才能离下来呢。

eric1993

回复 Dunncao 的帖子+ ?# [1 X/ h, ~" x) F

1 I: @  r' x7 I离心力是有2460N

Dunncao

回复 eric1993 的帖子) w/ A1 |- u: n5 f0 m% [

# {6 l! n" y5 O: |0 x, w那就是只有246G呗，显然太小了呀。