关于骨髓间充质干细胞向内皮细胞诱导的问题

ariel823

请教一下各位前辈：9 c# D1 B% _9 R/ v( v) I" T# I" k" @
我用人骨髓间充质干细胞诱导内内皮细胞，诱导液是α-MEM，5%胎牛血清，50ng/ml VEGF, MSC用的是第2代，接种时密度是2×10的4次方，但是诱导一周后MSC貌似没有分化的趋势而是增殖，并且我做了两次不同人的标本都是这样，增殖的程度就是在细胞生长的漩涡状中心叠加生长，这是怎么回事呢？是我诱导液配的有问题吗？

savid888

帮顶一下7 a) ~9 @) ^, D1 u7 }
另外，文献的做法和你一样吗？

iceyang

骨髓间充值很难向内皮诱导，你可以去看看你查的文献，一般影响因子不会很高的，只是诱导出来可以鉴定一些表型，功能很少有。建议你如果有骨髓的话，想做内皮诱导，还是要使用其中的内皮祖细胞，另外培养液换成EGM最好。

ariel823

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是啊 我是按文献做的 但是做不出来啊~欲哭无泪啊

ariel823

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不好意思啊 最近没上网 才看见回复 我看有很多文献都说自己诱导出来了 本以为不是难事 老板的基金课题是研究MSC→EC的分化机制的 我很无奈啊 如果还是用MSC但是培养液换成EGM可以吗？3 S9 b5 b1 r3 s( N6 @

iceyang

回复 ariel823 的帖子5 C6 C( ~, z) _8 ?

8 \9 o7 n/ i" ]: P0 q可以做是可以做，你用VEGF诱导看看吧，表型两周左右可以出来的，但是功能难说。
: |. V/ A6 E: o- m7 j' _7 V你还要考虑创新性的问题，别人做出来了你再去做的意义你要想一下，老外也会捣糨糊的，不能完全相信老外的PAPER，好一点的杂志可信度高。

ariel823

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6 @. K4 _8 T, ?9 l, E6 W- d/ J
- C7 I( G; ]3 Z$ D- |谢谢你的建议，之前看到你的回复了，但是可能是系统BUG，我一直想留言留不上，我看第一个纯VEGF诱导方案的原始文章（oswald）他只用了7天的时间，我现在新的一批诱导了10天了，但是表型还是没有出现，我是应该做标志物鉴定，还是在等4天？

ljzmy82

一般诱导12天比较好，需要加VEGF

iceyang

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7 g3 o( K0 U5 U8 P! G1 m5 X$ H$ ^$ |/ t4 Y/ _5 C, Z
你说的表型应该是指形态，细胞长成铺路石样吧？这个很难，用BMSC的话，我说的表型是指你可以用这样的细胞去做一下流式检测，看一下一些经典的内皮细胞标志：如CD31,VE-CAD,eNOs等等，当然也可以做细胞荧光但是要找比较像铺路石样的区域来做。祝好运

ariel823

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9 y5 U1 @. i  F0 H, N7 x% C好的 谢谢 那我这两天就该做检测了