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标题: 用加抗生素的盐水能洗去菌吗 [打印本页]

作者: baoweih 时间: 2018-11-20 16:33 标题: 用加抗生素的盐水能洗去菌吗

请教各位老师，用加了抗生素的培养基培养细胞，如果有菌的话，14天内会死掉吗，还是只是抑制它生长？加抗生素洗涤能洗去吗

作者: 保罗闫 时间: 2018-11-21 14:54

这个还真没试过唉。

作者: 阿秀哥 时间: 2018-11-28 14:30

本帖最后由阿秀哥于 2018-11-28 14:31 编辑
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处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！2 O1 I' B* {  ~% T
1）.将污染的培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。+ O& }, U* V# {/ O( |% k9 Q) Q  E( s
2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。
3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。0 _7 |7 T3 }2 B2 G4 |' d0 b* u* I1 @
4）.重复步骤3再洗。
5）.重复步骤3再洗。: v8 p: _$ v* b
6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。
9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。
10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养，培养体系加入2ml双抗.
11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。1 Y2 V! a% H9 k& `; I
以上是对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同。
希望对你有用。

作者: 快乐男孩 时间: 2019-1-9 13:47

回复 baoweih 的帖子) ^: \' Y, u0 \) `, i% v

如果污染的话建议放弃样本吧。很难控制。

作者: 没有名字H 时间: 2019-1-11 09:59

只能抑菌不能除菌，而且细菌量太多也没用的，细胞培养的话污染建议丢弃

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