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标题: 抗胸腺细胞球蛋白在HLA配型部分相合的造血干细胞移植患者的药代动力学 [打印本页]
作者: 文献管理员    时间: 2009-3-3 12:34     标题: 抗胸腺细胞球蛋白在HLA配型部分相合的造血干细胞移植患者的药代动力学

作者：张晓辉作者单位：北京大学人民医院血液病研究所， 北京 100044 0 E) j/ v7 t: l3 b
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! q* G) c) o4 M: O& M2 N% m! P            . K! m  g5 v9 B' ]+ G% C, M
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          【摘要】  为了研究抗胸腺细胞球蛋白（antithymocyte globulin,  ATG）在HLA配型部分相合造血干细胞移植患者体内的药代动力学，将2003年10月至2004年10月北京大学血液病研究所骨髓移植部15例患者纳入本研究方案并应用ATG，其中AML 5例、CML 6 例、ALL 3例、AA 1例。给15例接受HLA部分配型相合造血干细胞移植术患者静脉滴注ATG，剂量为10  mg/kg,分4天给药，用 ELISA Fc法检测ATG血药浓度，用3P97程序根据房室模型进行数据处理。结果表明： ATG为超长半衰期药物,剂量2.5  mg/d连续应用4天，血药浓度随之升高，移植前5天血药浓度上升到44.8%。根据AIC(Akaike's information criterion)，该值符合一级消除动力学的二室模型；主要药代动力学参数：  AUC0t    3 415.9 ±216.2   mg/（L·d） ;  Cmax 136.0±10.31 mg/L， ATG的达峰时间（Tmax）为4.8±0.7天； t1/2 为29. 7±2.60天； ATG表观分布容积的平均值为 0.12±0.02  L/kg； CL(s) 为0.002927   L/d，  ATG体内有效的血药浓度至少维持90天。在给药期间患者未出现严重药物不良反应，耐受性好。结论： 含总剂量10 mg ATG预处理方案，临床有效，患者安全耐受，适宜用于HLA部分相合的造血干细胞移植患者，ATG在机体的药代动力学无种族差异性。 . \7 R( Q4 L4 V7 S( v  M
          【关键词】抗胸腺细胞球蛋白 药代动力学 HLA配型部分相合造血干细胞移植
  x7 ]3 n  V# e$ Q6 L                  Pharmacokinetics of Antithymocyte Globulin in RecipientsUndergoing HLA Partially matched Hematopoietic Stem Cell Transplantation
( c5 l# v( P$ m1 D( S1 J2 M+ y& I/ Y5 o/ V, |8 P
ZHANG XiaoHui,HUANG XiaoJun, LIU KaiYan, XU LanPing, LIU DaiHong, LU DaoPei
* l0 d. s- l: K# h# V
- d: H( e$ L# [' _, @4 L/ bInstitute of Hematology and People Hospital, Peking University, Beijing 100044, China
2 f( b5 Z. c* Y% v. Y, G
1 h0 ^1 _! i2 B8 bAbstractThe aim of study was to investigate the pharmacokinetics and distribution of antithymocyte globulin(ATG) in recipients of partially HLAmatched hematopoietic stem cell transplantation. Fifteen patients with hematological disorders were received hematopoietic stem cell transplantation from partially HLAmatched related donor between October 2003 and October 2004in the Institute of Hematology and People Hospital, Peking University. All patients including5 cases of AML, 6 cases of CML, 3 cases of ALL, 1 case of AA were consecutively enrolled in the present study after providing written informed consent. Antithymocyte globulin was administered before allogeneichematopoietic stem cell transplantation at a dose of 2.5 mg/kg daily for 4 consecutive days (total dose of 10 mg/kg) in the conditioning regimen. The concentration of rabbit ATG in the serum of 15 patients was measured using a new enzymelinked immunoabsorbent assay (ELISA) for the Fc portion of rabbit IgG. The results showed that the washout phase of ATG elimination was analyzed over 0-120 days, results were wellfitted by a single exponential decay giving a mean elimination halflife (t1/2 beta) of 29.67±2.60 days.A mean value for the apparent volume of distribution of ATG (V)obtained by analysis of datawas0.12±0.02 L/kg body weight.The serum concentration of ATG increasedup to 44.8%at5 day beforetransplantation,peak concentration of ATG was 136.0±10.3 mg/L,its concentration slowly descend at 0 day, fall up to 7.1±0.06 μg/ml at90 day after dosing; tmax 4.8±0.7 days;According to AIC (Akaike's information criterion), two compartment model of ATG was estimated. It is concluded thatthe conditioning regimen containingthe dosage of 10 mg/kg of ATGis effective and safely in recipients of partially HLAmatched hematopoietic stem cell transplantation. There is no racial difference in the pharmocokinetics of ATG.% t+ V" k/ Y3 k

" b) ]* G! _. f" YKey wordsantithymocyte globulin; pharmacokinetics； partiallyHLAunmatched HSCT+ G$ q) }6 C- D6 N

2 }7 q( C. i$ W6 ]3 ]* l4 wJ Exp Hematol 2007; 15(1):152-155
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8 M, b7 {, x% F3 `+ F; z" K抗胸腺细胞球蛋白（antithymocyte globulin, ATG ）在HLA配型部分相合异基因造血干细胞移植（HSCT）中能防治移植物排斥和移植物抗宿主病（GVHD），并可促进植入［1］。本研究旨在通过酶联免疫吸附（ELISA）法检测ATG药物浓度，进一步研究ATG在我国HLA配型部分相合HSCT患者体内药代动力学特征，为临床HSCT患者更合理应用ATG提供药代动力学参数及理论基础。6 S; P) x* R9 Y$ n+ _" A/ E
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药品、试剂和仪器* x; q4 E2 ?# g. N1 E; B) H

+ u% C& k1 ]) i6 q* P即复宁（兔抗人抗胸腺细胞球蛋白，rabbit antihuman thymocyte immunoglobulin, thymoglobulin），每支25mg，为法国Sangstat药厂产品。ATG检测试剂盒为晶美公司产品;450型酶标仪为Bio RAD产品。% S0 Q! Z- ?% A! H& j& E

' @3 g9 q# n2 @# W) ~. Y研究对象& e: k8 L+ `5 ^$ [; S1 m' ?
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病例2003年10月至2004年10月于北京大学血液病研究所骨髓移植部治疗的15例患者，男7例，女8例，中位年龄34.3岁（11-48），身高162-176（168.01±4.7）cm,体重55-76（67.21±7.49）kg。15例中AML 5例、CML 6例、ALL3例、AA1例,他们都是接受HLA部分配型相合造血干细胞移植术的患者
* `. B# }3 u; c5 o6 j7 [6 `$ X& b4 f# g* j- i* [1 q6 S
纳入标准接受HLA部分配型相合造血干细胞移植术的患者,治疗前均接受全面体格检查,肝肾功能、心电图和胸片正常。实验前本人签署知情同意书。
, B+ j" T3 J5 E4 k; X8 f1 m- {
. F, T! G5 `8 {1 X: V, w排除标准接受HLA部分配型相合造血干细胞移植术的患者对ATG有过敏反应，及肝肾功能或心功能异常。
( F$ j, R; s+ J9 k9 d! G9 J, ~- v6 a: v& L5 E* c) m
给药方案患者应用总剂量10 mg/kg，分别于造血干细胞移植前5，4，3，2天按2.5 mg/(kg·d)剂量静脉输注,输注速度大于6小时。用药过程中注意观察记录患者的生命体征及药物的不良反应，如发生严重不良事件，立即封存所有器械，并采取急救措施。整个用药过程均在医护人员的监护下进行。
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$ C0 T# l$ s" Z. k5 G血样的采集7 b- q, _5 J- C. r: I
, Z' L0 i! l8 [6 o! |# F! s: b
患者在ATG输注前及输注后5天始至180天内，每天于给药后1、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22小时分别取对侧肘静脉血4 ml； 给药结束后1天开始每天采血4次，测定血药谷浓度和峰浓度，停药后继续观察连续给药后ATG的消除。8 \2 g& O3 N* {( B
; q3 \. R- Z" @) G' }+ u. g4 q, [
血液样品的处理, n9 ^$ G3 u+ A$ k

" g( q  s  s; K5 ~# \将血样品在室温下静置30分钟,24℃ 3000 rpm离心10分钟,分离血清,置-70℃冰箱冷冻保存待测。
: h0 _1 ]; E# O) ^9 N9 x
# [3 s# r5 x9 z. m血清ATG浓度的检测［1］
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用酶联免疫吸附 (ELISA) 试验法进行总的ATG定量分析。有血样的96孔培养板用抗兔IgG包被，以俘获抗体。按实验设计，分别加兔IgG标准100 μl/well，浓度稀释范围为1.1-200 μg/ml，浓度从高到低依次设7孔，检验样品用含有0.1% BSA的PBS稀释20倍，以阻断非特异结合；稀释的检验样品100 μl/well,封板胶封口，37℃孵育2小时，洗涤液洗板3次，300 μl/well，洁净吸水纸拍干； 按1∶160倍稀释辣根过氧化物酶（HRP）标记羊抗兔IgG(H L)，100 μl/well，封板胶封口，37℃孵育1小时；洗涤液洗板3次，300 μl/well，用去离子水冲板5次，洁净吸水纸拍干；加含有TMb的显色剂，100 μl/well，室温显色5分钟,加终止液100 μl/well，酶标仪测定在450 nm波长下吸光度(A)。 每一浓度平行测3管。以标准品的浓度（C）对吸光度(A)做直线回归，得回归方程；以回归方程计算待测血清ATG浓度。如测定A值超过线性检测范围，则将待测血清以稀释依次倍比稀释后重新测定，直至其测定结果落于线性检测范围内。; B8 ^) `9 m: |/ T

' J- Y( g0 ]) c; p/ T; e- m血药浓度测定方法的建立3 q, O, S3 s1 T& E% _6 X& O

4 r  o, `7 X$ G1 S  ]& y4 S& xATG浓度用ELISA测定，其最低检测浓度为0.0110 μg/L, 线性范围为0.0110-3.6 μg/L,标准曲线的回归方程为A=-0.0109C 1.6821(r=0.9881)。血清回收率为95.8% -118.9%，孔内变异系数波动于5.3%-8.9%，孔间变异系数波动于6.0%-8.1%。ATG的日内精密度和日间精密度见表1。由表1可见，这两个精密度均
) f$ h3 L1 }* m. Q2 n& g' _- i  W0 A$ Z- u$ H" ~" i) j
药代动力学参数计算8 c$ a$ i  v# ]8 g4 s

4 f* o! D: k: ?6 [8 {/ P4 p( O7 `# {根据测定所得血药浓度，数据经核对无误后,录入计算机数据库.采用practical pharmacokinetics program (3P97)计算程序,进行拟合,确定权重和房室模型, 计算ATG药物代谢动力学参数，包括半衰期（t1/2α， t1/2β）,血药浓度时间曲线下面积（AUC）、分布容积（V）和清除率（CL）等。AUG用梯形法计算，Cmax、 tmax用实测值。
+ k. l1 v$ G8 M! l: M9 X7 {
/ B: Z5 x) }* e% J5 y7 N结果: b( L6 d$ ]' Z9 E* I

. {$ z1 s7 i7 f: G6 c3 SATG血药浓度时间曲线- K/ J, ?' x/ Y  ?2 z# y9 }

; H1 q' P7 m" I" _! p; m8 Y15例HLA配型部分相合造血干细胞移植患者应用ATG的血药浓度时间曲线见图1。
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Figure 1. Relationship of mean serum ATG concentration with time following intravenous multipledosein15 patients.
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15名患者从预处理前5天开始应用ATG，连用4天，其血药浓度呈类抛物线型，用药第2天第1次用药后1小时,血药浓度增加 44.8%；用房室模型进行拟合结果发现， 为2室模型，权重系数为1/c/c。, I5 z7 H9 A' \+ q3 B7 S4 F

: K, b! |! [/ W# l5 ]1 b造血干细胞移植后ATG药物代谢动力学7 p# j, ]. i6 V5 _/ @  ?. p
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ATG药物代谢动力学检验结果见表2。由表2可见，分布半衰期 t1/2α=（3.15±0.78）天；消除半衰期t1/2β=（29.67±2.60）天；V (c)为0.12±0.02； AUC0t为3 415.9 mg/（L·d); Cmax为136.0±10.3 mg/L； tmax为（4.8±0.7）天； 给药90 天ATG浓度为7.1±0.06 μg/ml; ATG药物动力学方程C=62.128330e-0.220246t 73.212563e-0.02336t: ]7 X: l1 H2 h+ E  M1 H

) b( c( B8 ~1 X根据该方程计算其时间浓度数据作图见图2。结果表明，实验值与计算值两线拟合度较高。
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ATG的耐受性
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15例配型部分相合造血干细胞移植患者，在ATG应用前均用非那根及氟美松等药物预防不良反应。不良反应主要为发热93.9%，出现发热的中位时间1.8±0.9（1-120）小时；寒战45.5%，出现寒战的中位时间1.3±0.5（0.5-11）小时，皮疹25.8%，出现皮疹的中位时间2.1±0.3（1-145）小时；头晕9.6%，出现头晕的中位时间6.3±0.3（1.5-72）小时；心悸6.5%，出现心悸的中位时间0.5±0.06（0.2-3）小时；皮肤搔痒16.1%，出现皮肤搔痒的中位时间0.8±0.07（0.3-11）小时；经激素等治疗，当日患者症状缓解，未出现严重不良反应，耐受性好。研究结果表明，上述不良反应均与血药浓度无相关性。
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讨论
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2 h8 L& |! p9 ?ATG是含有IgG和IgM多克隆免疫球蛋白，它是异基因造血干细胞移植应用的重要的免疫抑制剂之一［2］，广泛应用在器官移植及造血干细胞移植等诸多领域，为避免患者过度免疫抑制而发生严重感染和复发，以及ATG药物血浓度过低而疗效欠佳，因此探索造血干细胞移植患者个体化的最佳ATG剂量尤为重要。# B' v  b: T5 y. c
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ATG的的免疫抑制疗效及不良反应与其药代动力学密切关联。本研究探讨了ATG在中国人体内药代动力学特点,以期为临床设计给药方案提供试验依据。研究结果表明，试验所得药代动力学参数与国外文献报道基本一致［1］，说明ATG在机体的药代动力学无种族差异性。本研究采用ELISA 试验法。此方法具有样本处理简单、用时短、检测费用低等优点。本研究中ATG总剂量为10 mg/kg， 移植前5天开始应用ATG， Cmax为136.0±15.31 μg/L; 0天开始呈缓慢下降，ATG 浓度在移植后90天仍可检测到，代谢缓慢。ATG的血药浓度呈剂量依赖性。药代动力学研究提示，在用药第1天单次给足量，可获得最大ATG血药浓度，而临床上大剂量ATG可引起患者高热、腹痛、甚至过敏性休克而危及生命［3］。研究结果证实分次给药既可维持疗效,又避免药物在体内蓄积。根据AIC等数据，判定ATG的药物代谢为2室模型。- J% E8 @9 p/ W6 V% ~

2 _, \% q  a7 H( I半衰期（halflife）是机体内药物浓度（或量）下降一半所需的时间。ELISA检测结果表明，ATG在人体内按单指数幂的方式缓慢消除，消除半衰期（t1/2 β）为29.67天，说明ATG为超长半衰期药物［4,5］。ATG体内有效的血药浓度至少维持90天。由于ATG的消除半衰期很长，因此临床每日应用等量ATG剂量，可造成ATG的体内蓄积。蓄积是很多药物产生临床治疗作用的先决条件，同时也是药物产生不良反应的重要原因。评价药物在连续给药过程中患者体内蓄积，对临床用药的个体化有很重要的作用；表观分布容积（apparent volume of distribution, Vd）是用血药浓度来估计体内药量的一个比例常数，是一个独立参数： Vd=X0/C0 ［6］。分布容积大，药物在体内排泄较慢，人体细胞外液体积约0.21 L/kg，人体总液量为0.6 L/kg。Vd值为0.14-0.29L/kg ，表明药物主要分布在细胞外液； Vd值为0.3-0.4L/kg，说明药物主要分布在细胞内； Vd值接近0.6 L/kg，说明药物分布在细胞内、外液；如果Vd值更大，则表明组织摄取多，血浆中的药物浓度较低［7，8］。本研究中ATG Vd值为0.11 L/kg，说明ATG药物体内分布主要在血浆和细胞外液，ATG不分布于疏水组织。研究结果认为，肥胖患者用ATG时应去除脂肪重量，避免由于按患者体重计算ATG量，导致较高的血浆浓度而产生过度免疫抑制［9］。
( y$ v$ _" m% {* j6 @' W; y
9 Y# `) F" _# D1 g本研究结果表明，ATG为超长半衰期药物且疗效呈剂量依赖，提示应用ATG应防治移植后感染和早期复发；根据表观分布容积提示肥胖患者用ATG要防止其过量而产生过度免疫抑制。本研究中未出现严重不良事件，因此根据ATG安全耐受的结果及药代动力学特点，初步推荐ATG用在HLA配型部分相合的造血干细胞移植患者时，按10 mg/kg分次静脉输注是安全有效的。
( B& H" U$ ?: w. ~3 J          【参考文献】
' R2 D4 f' x, V9 K1Eiermann TH, Lambrecht P, Zander AR. Monitoring antithymocyte globulin (ATG) in bone marrow recipients. Bone Marrow Transplant,   1999;23:779-7811 D% m6 w9 |* k+ |- x6 [
: y% r$ h/ W% N' g+ N' z

8 o. R! [& U$ M  Q. o. w& F* Z+ V$ m+ J
5 L. _6 v, H' l, s: ]/ F    2Bunn D, Lea CK, Bevan DJ, et al.   The pharmacokinetics of antithymocyte globulin (ATG) following intravenous infusion in man. Clin Nephrol, 1996; 45: 29-32- d3 u" L7 ~* J" q1 ~; C
7 h( i( w# O# B  {" q$ l6 W

7 a' R+ G7 @* s$ h8 |
3 m- @1 T# s, B1 C, C    3Bock HA, Gallati H, Zurcher RM, et al. A randomized prospective trial of prophylactic immunosuppression with ATGfresenius versus OKT3 after renal transplantation. Transplantation, 1995; 59:830-840/ z' C) l2 ~3 t% z$ L* ~3 m
% G3 R: A: z4 l; v! n
6 @. ]; D2 R3 @/ p1 k7 `
& n$ N7 V( n9 K4 v& F
    4Guttmann RD, Caudrelier P, Alberici G, et al. Pharmacokinetics, foreign protein immune response, cytokine release and lymphocyte subsets in patients receiving thymoglobulin and immunosuppression. Transplant Proc, 1997; 29(7A):24S-26S
: c1 ~0 ?7 L/ R8 t8 e+ n
- V: E: ?+ E$ u* J' ^2 y
+ J) g# c# X: l) q8 U4 r+ ]0 ^2 n
* z: e( X, z3 ~$ y    5Gaber AO, First MR, Tesi RJ, et al. Results of the doubleblind, randomized, multicenter, phase III clinical trial of Thymoglobulin versus Atgam in the treatment of acute rejection episodes after renal transplantation. Transplantation, 1998; 66:29-37
) M4 s  ~+ e" \( u: k3 B; c* o' Z
) ]$ c6 \; v% `- y0 Q# K: n9 _* h5 `
) h7 {2 w+ J5 ]" l* x( A
    6Regan J, Campbell K, VanSmith L, et al. Characterization of antithymoglobulin, antiAtgam and antiOKT3 IgG antibodies in human serum with an 11min ELISA, Transpl Immunol,1997; 5:49-56* J& |+ J" T- \( `

* k4 R% ?# e) E& j$ f$ @3 R7 {4 V* @4 n" i2 e

7 w$ s1 f/ h4 Q. o# d    7Regan JF, Campbell K, VanSmith L, et al. Sensitization following Thymoglobulin and Atgam rejection therapy as determined with a ra pid enzymelinked immunosorbent assay. US Thymoglobulin MultiCenter Study Gruop. Transpl Immunol, 1999; 7:115-121# B. w$ y8 J# M& P" w1 X

; y0 b5 X2 s7 c; ~1 k0 Z) J/ p3 r9 P: e7 t

9 Q1 N. ^5 |' k% x    8Smith JM, Nemeth TL, McDonald RA. Current immunosuppressive agents in pediatric renal transplantation:  efficacy, sideeffects and utilization. Pediatr Transplant, 2004; 8: 445-453
& F) b$ y% ?! C/ M7 e5 Y9 N
5 _$ S  C1 K3 n$ w  k; }. {; C: M8 g# d: X  J) N

: L- H7 h4 I" U9 U6 h    9Seidel MG, Fritsch G, MatthesMartin S, et al. Antithymocyte glo bulin pharmacokinetics in pediatric patients after hematopoietic stem cell transplantation. J Pediatr Hematol  Oncol,  2005; 27:532-536［］μβαγ ±SD
作者: 张佳    时间: 2015-5-30 18:50

好啊，谢楼主
作者: 我心飞翔    时间: 2015-6-17 13:43

谢谢分享了!   
作者: txxxtyq    时间: 2015-6-18 10:01

回答了那么多，没有加分了，郁闷。。  
作者: biobio    时间: 2015-7-4 19:58

神经干细胞
作者: 舒思    时间: 2015-7-20 17:42

宁愿选择放弃，不要放弃选择。  
作者: laoli1999    时间: 2015-7-26 19:16

偶真幸运哦...  
作者: dypnr    时间: 2015-8-7 11:09

做一个,做好了,请看  
作者: s06806    时间: 2015-11-2 08:54

楼主也是博士后吗  
作者: 大小年    时间: 2015-11-4 10:07

不管你信不信，反正我信  
作者: 榴榴莲    时间: 2015-11-25 22:27

支持你一下下。。  
作者: 石头111    时间: 2015-12-9 12:18

谢谢分享了!  
作者: txxxtyq    时间: 2016-1-3 19:27

不错，看看。  
作者: 命运的宠儿    时间: 2016-1-13 16:33

楼上的稍等啦  
作者: 考拉    时间: 2016-2-19 08:12

应该加分  
作者: aliyun    时间: 2016-3-9 19:35

不是吧  
作者: 小丑的哭泣    时间: 2016-3-14 13:26

我该不会是最后一个顶的吧  
作者: 橙味绿茶    时间: 2016-4-9 12:18

楼主福如东海，万寿无疆！  
作者: 初夏洒脱    时间: 2016-4-24 14:00

有才的不在少数啊  
作者: 风云动    时间: 2016-4-28 14:10

应该加分  
作者: 修复者    时间: 2016-5-1 13:13

呵呵,支持一下哈  
作者: 温暖暖    时间: 2016-5-12 14:54

先看看怎么样！  
作者: nauticus    时间: 2016-7-12 14:35

家财万贯还得回很多贴哦  
作者: lab2010    时间: 2016-7-19 12:00

快毕业了 希望有个好工作 干细胞还是不错的方向
作者: Whole    时间: 2016-7-26 16:10

皮肤干细胞
作者: tian2006    时间: 2016-8-7 05:40

这贴子你会收藏吗  
作者: 三好学生    时间: 2016-9-11 12:27

对不起，我走错地方了，呵呵  
作者: syt7000    时间: 2016-9-11 18:18

这个贴不错！！！！！  
作者: ringsing    时间: 2016-10-2 08:22

琴棋书画不会，洗衣做饭嫌累。  
作者: 墨玉    时间: 2016-10-3 14:54

支持你就顶你  
作者: alwaysniu    时间: 2016-10-16 05:14

彪悍的人生不需要解释。  
作者: vsill    时间: 2016-11-1 20:13

楼主福如东海，万寿无疆！  
作者: 蝶澈    时间: 2016-12-31 22:39

真的有么  
作者: 兔兔    时间: 2017-1-3 15:54

人气还要再提高  
作者: myylove    时间: 2017-1-15 01:53

干细胞疾病模型
作者: Whole    时间: 2017-2-2 04:22

支持~~顶顶~~~  
作者: 蚂蚁    时间: 2017-2-27 19:10

晕死也不多加点分  
作者: doors    时间: 2017-3-9 15:00

不错!  
作者: tuting    时间: 2017-3-16 16:09

病毒转染干细胞
作者: 修复者    时间: 2017-3-28 09:01

干细胞之家是国内最好的干细胞网站了
作者: pcr    时间: 2017-3-31 01:18

嘿嘿......哈哈......呵呵.....哟~呼  
作者: dataeook    时间: 2017-4-4 23:33

21世纪，什么最重要——我！  
作者: biopxl    时间: 2017-4-5 00:56

干细胞之家是国内最好的干细胞网站了
作者: 化药所    时间: 2017-4-5 04:45

好贴子好多啊  
作者: ikiss    时间: 2017-4-10 21:16

是楼主原创吗  
作者: 三星    时间: 2017-4-17 06:01

dddddddddddddd  
作者: 墨玉    时间: 2017-4-29 04:41

小心大家盯上你哦  
作者: chinagalaxy    时间: 2017-5-1 17:17

我毫不犹豫地把楼主的这个帖子收藏了  
作者: myylove    时间: 2017-5-9 06:33

进行溜达一下  
作者: 依旧随遇而安    时间: 2017-5-27 04:07

说的真有道理啊！
作者: chongchong    时间: 2017-6-1 02:11

皮肤干细胞
作者: renee    时间: 2017-6-5 13:44

楼主good  
作者: 小丑的哭泣    时间: 2017-6-6 07:27

好帖子，要顶！
作者: lalala    时间: 2017-6-9 03:47

站个位在说  
作者: foxok    时间: 2017-6-10 01:59

回帖是种美德.  
作者: leeking    时间: 2017-6-10 05:04

顶也～  
作者: alwaysniu    时间: 2017-6-13 08:00

加油啊！！！！顶哦!!!!!  
作者: frogsays    时间: 2017-6-13 12:58

顶你一下，好贴要顶！  
作者: 甘泉    时间: 2017-6-16 22:07

我顶啊。接着顶  
作者: popobird    时间: 2017-6-19 15:10

我也来顶一下..  
作者: 初夏洒脱    时间: 2017-6-29 21:43

@,@..是什么意思呀？  
作者: haha3245    时间: 2017-7-5 17:39

不错!  
作者: lab2010    时间: 2017-7-31 18:55

今天没事来逛逛，看了一下，感觉相当的不错。  
作者: 锦锦乐道    时间: 2017-8-5 11:01

孜孜不倦， 吾等楷模 …………  
作者: 知足常乐    时间: 2017-8-8 23:19

这贴子你会收藏吗  
作者: htc728    时间: 2017-8-18 23:39

非常感谢楼主，楼主万岁万岁万万岁！  
作者: htc728    时间: 2017-8-29 15:16

回贴赚学识，不错了  
作者: 张佳    时间: 2017-9-9 05:43

好啊，，不错、、、、  
作者: 某某人    时间: 2017-10-18 13:32

应该加分  
作者: dglove    时间: 2017-10-21 14:28

不错 不错  比我强多了  
作者: 依旧随遇而安    时间: 2017-11-10 09:10

原来是这样  
作者: 蝶澈    时间: 2017-11-10 18:28

鉴定完毕.!  
作者: 坛中酒    时间: 2017-11-20 14:50

这个贴不错！！！！！看了之后就要回复贴子，呵呵  
作者: 橙味绿茶    时间: 2017-12-14 16:00

这个站不错！！  
作者: xuguofeng    时间: 2017-12-31 07:10

孜孜不倦， 吾等楷模 …………  
作者: bluesuns    时间: 2018-1-1 06:34

端粒酶研究
作者: 天蓝色    时间: 2018-1-13 05:57

我也来顶一下..  
作者: 老农爱科学    时间: 2018-1-17 21:10

声明一下：本人看贴和回贴的规则，好贴必看，精华贴必回。  
作者: 8666sea    时间: 2018-1-25 11:09

呵呵 那就好好玩吧~~~~  
作者: youngcell    时间: 2018-1-31 16:25

顶一个先  
作者: tempo    时间: 2018-2-2 04:51

呵呵 那就好好玩吧~~~~  
作者: 365wy    时间: 2018-2-6 04:40

这个贴不错！！！！！  
作者: 温暖暖    时间: 2018-2-6 22:18

一个有信念者所开发出的力量，大于99个只有兴趣者。  
作者: xiao2014    时间: 2018-2-24 23:33

是楼主原创吗  
作者: 983abc    时间: 2018-3-17 16:57

呵呵 都没人想我~~  
作者: 红旗    时间: 2018-3-23 21:36

给我一个女人，我可以创造一个民族；给我一瓶酒，我可以带领他们征服全世界 。。。。。。。。。  
作者: ringsing    时间: 2018-4-11 00:18

声明一下：本人看贴和回贴的规则，好贴必看，精华贴必回。  
作者: 我心飞翔    时间: 2018-4-11 10:55

很好！很强大！  
作者: 大小年    时间: 2018-5-20 07:22

角膜缘上皮干细胞
作者: myylove    时间: 2018-5-26 12:26

干细胞治疗糖尿病  
作者: ringsing    时间: 2018-6-12 11:35

人之所以能，是相信能。  
作者: xm19    时间: 2018-6-14 21:48

初来乍到，请多多关照。。。嘿嘿，回个贴表明我来过。  
作者: 科研人    时间: 2018-7-5 16:43

神经干细胞
作者: 咖啡功夫猫    时间: 2018-7-15 23:09

谢谢分享了!  
作者: 红旗    时间: 2018-7-22 06:08

回复一下  
作者: SCISCI    时间: 2018-7-23 17:47

好贴坏贴，一眼就看出去  
作者: dypnr    时间: 2018-7-28 07:25

肌源性干细胞
作者: 橙味绿茶    时间: 2018-7-28 09:27

鉴定完毕.!  
作者: happyboy    时间: 2018-9-4 16:02

我仅代表干细胞之家论坛前来支持，感谢楼主！  
作者: 再来一天    时间: 2018-9-24 15:22

我十目一行也还是看不懂啊  



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