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标题: PDF电子书：Western Blotting Handbook and Troubleshooting Guide(version 2) [打印本页]

作者: dahui 时间: 2011-3-12 09:56 标题: PDF电子书：Western Blotting Handbook and Troubleshooting Guide(version 2)

本帖最后由细胞海洋于 2011-3-12 17:58 编辑 , z: X4 f6 t, {2 E2 {: |

Introduction  1, d0 H- x3 ?9 p% d! l  P6 X9 d# O
Western Blotting Overview  2-3
Step 1 – SDS-PAGE
  Thermo Scientifc Precise Protein Gels  4 ) H6 w1 r! f" b3 C* l' n
  Molecular Weight Markers  5-6! G' S- z* Y8 H
Step 2 – Electro-Transfer $ B) R  K$ @$ j8 m4 }2 P
  Thermo Scientifc Pierce Fast Transfer System  7 ! {' A6 s- N  y, t5 l
  Transfer Buffers  8 : e$ S6 t3 S" p' O9 k" I9 w# D
  Filter Paper for Blotting  8 ! Y, `8 b) ?% o5 V- p3 ]
  PVDF and Nitrocellulose Membranes  9
  Thermo Scientifc Pierce Protein Stains 9  0 d4 U2 A& N' ]& ?9 f
for Membranes 2 k$ X! x3 h! ^( W: K
  Antibody Extender Solution NC  10 , l, P: M8 s+ X0 p3 H+ _
  Western Blot Signal Enhancer  114 b% d- H2 e" b% a% C6 \" }
Step 3 – Blocking
  Introduction  12 , U% H# I5 C  T
  Blocking of Nonspecifc Binding Sites on  12
Transfer Membranes * S( v$ y+ A6 w) R( H
  Blocking Buffer Optimization  12-13 4 Q& }( |% @2 |  f) U4 D8 }6 ?
  Blocking Buffers  13-16( @; A/ T" X+ i
Step 4 – Formulate Wash Buffers
  Washing the Membrane  17
  Wash Buffers  17
Step 5 – Detection Reagents
  Validated Primary Antibodies  18-19   u) X& J. L5 q3 S' L( @
  Affnity-purifed Antibodies  20 1 |* @- u' p9 y7 ]( {* R) c8 q$ o
  Stabilized HRP Conjugates  21
  Thermo Scientifc DyLight 22 3 l7 u' v5 X7 b! K/ e
Fluor Conjugates
  Conjugate Stabilizer Solutions  22
  Thermo Scientifc DyLight-labeled Highly  23
Cross-Adsorbed Secondary Antibodies
  Antibody Storage and Stabilizer Solutions  24
  Secondary Antibody Ordering Table  25-26
  Thermo Scientifc Clean-Blot IP  28-29   H; X8 s; B6 V" r* g
Detection Reagents 4 r! Z0 Y2 r, H# ?
  Protein A, G, A/G and L Conjugates  30
  Thermo Scientifc NeutrAvidin, Streptavidin 31-33 / B$ U2 J- @2 C1 `; B3 t) }# K
and Avidin Conjugates
Step 6 – Enzyme Substrates   u1 z4 q; w# r+ ?; C
Chromogenic Substrates  34-35 : B* j8 N) n  u6 g; |- |& _% J
Thermo Scientifc Chemiluminescent Substrates  36-43
  Pierce ECL Substrate  37 - `% X- a/ k1 h8 u
  SuperSignal Chemiluminescent 38-42 : M9 ?; D* ~: T+ d7 k
Substrates and Kits
  Lumi-Phos™+ G. F3 j. \7 ^( ~
Chemiluminescent Substrate  43 % a, i/ B+ h0 _8 F! y" H9 j, k. R
  Quick Reference Substrate Guide  43 ! Y; A4 J. z8 ]( {
Fast Western Blotting Kit  44
Specialized Western Blotting Kits  45-48 1 @. c* S7 Z) I( c# Z3 N" i
  Thermo SuperSignal West Pico HisProbe Kit  45
  Pierce O-GLcNAc Western Blotting Detection Kit  46
  Thermo Scientifc DyLight 549/649  46-47
Western Blotting Kit 5 |0 x: Q$ h$ ]- `6 o
  Thermo Scientifc DyLight 680/800 Near Infrared  47
Western Blotting Kit ( }4 T+ x  r3 w' t2 u8 Q8 J" @
  Thermo Scientifc Active GTPase Pull-Down  48
and Detection Kits
Far-Western Blotting  49 & ^  d3 @/ F$ }" d: i, ^/ Y3 r
In-Gel Western Detection  50-51 2 m0 E5 V" a4 G+ F4 M
  Thermo Scientifc Pierce In-Gel 51 8 ^+ B. k* l+ `4 P
Chemiluminescent Detection Kits
Step 7 – Film
  Thermo Scientifc CL-XPosure Film  528 U% ?7 w; t5 N5 d# m
Step 8 – Stripping Buffer
Optimizing the Signal-to-Noise Ratio  53-58
  Protocol for Stripping an Immunoblot  54 " F0 p5 ^) C: j' Z1 K. j0 L
  Thermo Scientifc Restore  55 + p- Q% i, o+ Q
Western Blot Stripping Buffers
  Thermo Scientifc Restore PLUS  56 / t: r, @  t7 }4 q7 R( F
Western Blot Stripping Buffers 0 S- q$ n. I% D9 C
  Thermo Scientifc Pierce 57-58
Background Eliminator
Troubleshooting Guide  59-69   y( Z# ~1 F+ X+ u/ x
  Blotting with Chemiluminescence  59
  Optimizing Antibody Concentration  60-63
  Problem Guide  64-67
  Full-Length Western Blotting Protocol Using 68-69
Chemiluminescent Substrates , V: u) z! p: ?& l. C  m
Recommended Reading  70

作者: 一枝独秀 时间: 2011-3-12 13:13

能发到我的邮箱吗？我看不到内容superspinner@126.com

作者: jiandong2001 时间: 2011-3-12 18:54

好久没有来这里了！谢谢分享

作者: 军医 时间: 2011-3-12 19:15

谢谢分享！

作者: 深海寂寞鱼 时间: 2011-3-12 19:51

好资料学习ing

作者: 白衣小彩 时间: 2011-3-12 19:54

学习学习

作者: sunyucheng 时间: 2011-3-12 19:58

看看

作者: daviddow 时间: 2011-3-12 20:45

thanks for sharing it

作者: mominglily 时间: 2011-3-12 20:58

谢谢

作者: qlwj 时间: 2011-3-12 21:27

新手上路，能发到我的邮箱吗？我看不到内容ql_tjgk@hotmail.com

作者: vae有何不可 时间: 2011-3-12 22:17

好资料

作者: ivantanqi 时间: 2011-3-13 00:12

Thanks for sharing

作者: zhenhua 时间: 2011-3-13 00:15

呵呵，半广告

作者: doctor009 时间: 2011-3-13 00:46

作者: henryjia 时间: 2011-3-13 06:11

good

作者: zhujiang1021 时间: 2011-3-13 08:15

谢谢

作者: BenHantun 时间: 2011-3-13 09:04

学习

作者: future007 时间: 2011-3-13 09:04

极其需要

作者: wolf413 时间: 2011-3-13 09:59

新手上路，可以发到邮箱吗？谢谢# d& z o1 X1 g8 q3 |
wangfang413@hotmail.com

作者: 小伟-虎啸龙 时间: 2011-3-13 11:58

看不到内容，求发到本人邮箱842109825@qq.com

作者: jitianxing7021 时间: 2011-3-13 13:16

好资料学习

作者: longer 时间: 2011-3-13 14:57

好书，谢谢。

作者: lh_kitty 时间: 2011-3-13 15:11

新手上路，能发到我的邮箱吗？我看不到内容liuhui1101@sina.com

作者: xiao6tao 时间: 2011-3-13 16:21

好资料学习哈

作者: uyunbilig 时间: 2011-3-13 19:49

谢谢分享！

作者: cqgangzi 时间: 2011-3-13 21:27

谢谢楼主分享

作者: kao3yan 时间: 2011-3-13 22:04

新手上路，学习学习

作者: 临床干细胞 时间: 2011-3-13 22:39

谢谢

作者: 一转身的距离 时间: 2011-3-13 23:13

好东西，能发份到我邮箱吗？级别不够看不见pp_614@126.com" M9 C/ i0 a# i& ~; ^9 V
非常感谢！

作者: xiaxin1900 时间: 2011-3-14 00:13

请指教，希望发到邮箱，非常感谢，非常感谢！373657996@qq.com

作者: echo13032619 时间: 2011-3-14 00:13

i am fish could u pls sent it to my email? echo13032619@163.com

作者: iseeyou1210 时间: 2011-3-14 00:31

good!

作者: iseeyou1210 时间: 2011-3-14 00:35

the book is sent!

作者: kouke80 时间: 2011-3-14 08:20

好书，感谢。

作者: sunnylily 时间: 2011-3-14 09:43

thanks

作者: shewawa 时间: 2011-3-14 10:13

学习下

作者: pzxh 时间: 2011-3-14 15:52

谢谢楼主分享！

作者: hany2007 时间: 2011-3-14 20:46

看来又得回头看看

作者: siyue13 时间: 2011-3-14 21:09

哎呀，这个要顶顶

作者: sheepthief 时间: 2011-4-27 00:10

这是好书啊

作者: alioli 时间: 2011-11-3 01:15

谢谢分享，最近western做得郁闷啊

作者: viv2005 时间: 2011-11-3 08:51

下一个看看勒

作者: aidiulgy9517 时间: 2011-11-3 09:29

谢谢分享

作者: chendongbo338 时间: 2011-11-3 09:52

学习一下

作者: cherrysung 时间: 2011-11-3 10:01

也是新手，看不到，很想学习，谢谢！邮箱qiqi2008_cn@hotmail.com

作者: 白色的风 时间: 2011-11-3 10:25

谢谢楼主

作者: zhangyan813 时间: 2011-11-3 10:51

收藏了！

作者: czzhaozhu 时间: 2011-11-6 10:43

看看吧！

作者: xiangchou812 时间: 2011-11-6 11:20

不错的东东!!!

作者: xiangchou812 时间: 2011-11-6 11:25

不错的东东!!!

作者: 亮亮燕燕 时间: 2011-11-15 21:49

谢谢

作者: phpzs 时间: 2011-11-16 21:10

下周了呵呵% u8 x; V! K$ ~# R4 z

作者: zouxiaonan2006 时间: 2012-7-11 10:58

我是新手看不到内容麻烦您能发到我邮箱里么 zouxiaonan2006@126.com

作者: 榴榴莲 时间: 2015-5-24 16:06

这贴子你会收藏吗

作者: yukun 时间: 2015-6-5 19:27

这个贴好像之前没见过

作者: dulaiyouyu 时间: 2015-6-8 04:00

蛋白质印记

作者: 泡泡鱼 时间: 2015-6-9 09:27

貌似我真的很笨????哎

作者: 罗马星空 时间: 2015-7-8 18:15

这样的贴子，不顶说不过去啊

作者: 剑啸寒 时间: 2015-7-11 20:05

我卷了~~~~~~~

作者: beautylive 时间: 2015-8-22 21:10

今天的干细胞研究资料更新很多呀

作者: nauticus 时间: 2015-8-26 06:27

要不我崇拜你?行吗?

作者: 杏花 时间: 2015-9-13 21:13

回复一下

作者: aakkaa 时间: 2015-9-16 13:20

顶的就是你

作者: 罗马星空 时间: 2015-9-16 15:09

终于看完了~~~

作者: 我心飞翔 时间: 2015-10-8 05:58

这个站不错！！

作者: bluesuns 时间: 2015-11-15 09:16

厉害！强~~~~没的说了！

作者: foxok 时间: 2015-12-29 15:09

感謝樓主干细胞之家真的不错

作者: immail 时间: 2016-1-5 19:57

很有吸引力

作者: 我心飞翔 时间: 2016-1-10 11:35

小生对楼主之仰慕如滔滔江水连绵不绝,海枯石烂,天崩地裂,永不变心.

作者: ringsing 时间: 2016-2-23 20:22

帮你项项吧

作者: dogcat 时间: 2016-2-28 16:45

加油站加油

作者: 石头111 时间: 2016-3-8 15:18

我的啦嘿嘿

作者: 123456zsz 时间: 2016-4-5 12:09

不错，看看。

作者: chongchong 时间: 2016-4-11 16:18

谢谢干细胞之家提供资料

作者: biodj 时间: 2016-4-13 10:35

彪悍的人生不需要解释。

作者: 蝶澈 时间: 2016-4-17 21:42

好贴子好多啊

作者: 刘先生 时间: 2016-4-22 10:27

楼上的话等于没说~~~

作者: 快乐小郎 时间: 2016-4-26 22:52

回贴赚学识，不错了

作者: 初夏洒脱 时间: 2016-5-11 16:27

呵呵大家好奇嘛来观看下~~~~

作者: wq90 时间: 2016-5-22 16:10

似曾相识的感觉

作者: pengzy 时间: 2016-5-26 14:18

初来乍到，请多多关照。。。嘿嘿，回个贴表明我来过。

作者: 追风 时间: 2016-6-7 21:34

就为赚分嘛

作者: 再来一天 时间: 2016-7-13 19:01

端粒酶研究

作者: lab2010 时间: 2016-7-22 19:35

干细胞疾病模型

作者: cjms 时间: 2016-8-2 10:54

支持一下吧

作者: 杏花 时间: 2016-8-27 17:10

努力~~各位。。。

作者: 三星 时间: 2016-9-8 14:55

哈哈瞧你说的~~~

作者: 黄山 时间: 2016-9-16 20:28

神经干细胞

作者: 小倔驴 时间: 2016-9-23 22:26

好人一个

作者: kaikai 时间: 2016-9-24 14:18

我想要`~

作者: 未必温暖 时间: 2016-10-20 17:35

赚点分不容易啊

作者: 红旗 时间: 2016-11-4 08:02

我在顶贴~！~

作者: Whole 时间: 2016-11-24 14:52

希望大家都有好运

作者: ikiss 时间: 2016-12-4 10:35

偶真幸运哦...

作者: 天蓝色 时间: 2016-12-7 19:46

挤在北京，给首都添麻烦了……

作者: 某某人 时间: 2016-12-20 08:27

不是吧

作者: 三星 时间: 2016-12-26 20:00

楼主也是博士后吗

作者: hmhy 时间: 2017-1-10 03:00

我十目一行也还是看不懂啊

作者: mk990 时间: 2017-1-11 21:57

加油站加油

作者: 桦子 时间: 2017-1-18 21:18

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