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标题: 研究人员找到体细胞克隆成功率低原因（附原文） [打印本页]

作者: songzxj 时间: 2012-2-3 14:41 标题: 研究人员找到体细胞克隆成功率低原因（附原文）

本帖最后由细胞海洋于 2012-2-8 01:18 编辑
  d; o4 t8 A& u# P
  % S( d$ _9 N9 t9 I5 N1 i% X
日本研究人员在最新一期美国科学杂志《发育生物学》网络版上发表报告说，他们已经找到了体细胞克隆技术成功率低（2%至3%）的原因。$ d* `5 v  \1 g( O  z& t* y
! b. \9 s0 q5 e
日本理化研究所等机构研究人员发表的这一报告说，他们观察了330个小鼠的克隆胚胎细胞分裂情形，结果发现细胞核内染色体异常分配，第三次分裂时（从一个细胞逐次分裂为8个细胞），约80%的胚胎细胞出现异常，因而未能发育成小鼠。而在普通胚胎中，这一时期的异常率约为30%。
- o$ D1 |& V9 |
参与这一研究的大阪大学特聘副教授山县一夫说：“由于弄清了原因，在很早的阶段就可以识别出正常的胚胎，从而提高成功率。染色体的分配异常也被认为是不孕的一个原因，新发现也许有助于帮助弄清不孕的详细机制。”

人们普遍希望将体细胞克隆技术广泛应用在畜产业、医疗和灭绝动物复活等领域，著名的克隆羊多利就是世界上第一头体细胞克隆动物。然而，距多利诞生已过去15年，这种技术依然不成熟，成功率仅有2%至3%。（来源：新华网蓝建中）* w, g9 G% g4 c, U' H, @7 c
& c2 g; L+ [0 D# ~4 ]
Abnormal chromosome segregation at early cleavage is a major cause of the full-term developmental failure of mouse clones. Y+ f0 M$ `4 {, Q. t' a  E
& p: J+ \4 k6 G. M
To clarify the causes of the poor success rate of somatic cell nuclear transfer (SCNT), we addressed the impact of abnormalities observed at early cleavage stages of development on further full-term development using ‘less-damage’ imaging technology. To visualize the cellular and nuclear division processes, SCNT embryos were injected with a mixture of mRNAs encoding enhanced green fluorescent protein coupled with α-tubulin (EGFP-α-tubulin) and monomeric red fluorescent protein 1 coupled with histone H2B (H2B-mRFP1) and monitored until the morula/blastocyst stage three-dimensionally. First, the rate of development of SCNT embryos and its effect on the full-term developmental ability were analyzed. The speed of development was retarded and varied in SCNT embryos. Despite the rate of development, SCNT morulae having more than eight cells at 70 h after activation could develop to term. Next, chromosomal segregation was investigated in SCNT embryos during early embryogenesis. To our surprise, more than 90% of SCNT embryos showed abnormal chromosomal segregation (ACS) before they developed to morula stage. Importantly, ACS per se did not affect the rate of development, morphology or cellular differentiation in preimplantation development. However, ACS occurring before the 8-cell stage severely inhibited postimplantation development. Thus, the morphology and/or rate of development are not significant predictive markers for the full-term development of SCNT embryos. Moreover, the low efficiency of animal cloning may be caused primarily by genetic abnormalities such as ACS, in addition to the epigenetic errors described previously.& m" G+ Q) c$ B: `$ z
http://www.sciencedirect.com/sci ... i/S0012160612000048 ! b' M2 @' _" n" ]! t1 l# i' W

13楼原文感谢songzxj 提供

作者: songzxj 时间: 2012-2-3 14:42

克隆效率低下的大幕可能正被徐徐拉开！

作者: Tlexander 时间: 2012-2-3 14:47

而在普通胚胎中，这一时期的异常率约为30%。???
什么意思？, o3 \* U* J0 I# U7 n
难道老鼠的不育率至少有有30%

作者: waitgrain 时间: 2012-2-3 15:20

本帖最后由 waitgrain 于 2012-2-3 15:21 编辑 . ]) h4 O4 p7 n! ^
) h4 P" c W! \8 E
回复 Tlexander 的帖子

受精卵的异常率不是个体的

作者: Tlexander 时间: 2012-2-3 15:41

回复 waitgrain 的帖子9 P R2 y' V) Z2 V: |; I

1个老鼠不是有好几个胎儿吗？为什么不能谈率？？

作者: waitgrain 时间: 2012-2-6 08:45

回复 Tlexander 的帖子

比如：一只母鼠有18个受精卵，但是最后只能正常生产12只幼崽，但这并不是不育，不育率指的是完全不能怀孕

作者: Tlexander 时间: 2012-2-6 08:51

回复 waitgrain 的帖子

但我觉得“而在普通胚胎中，这一时期的异常率约为30%”) L' i* h2 g( m: b8 V4 L
( i ^0 Y( a1 x: r6 t
是在说，胚胎发育的成功率，而非个体的是否能成功传代呢?
2 @# _) g! [( |* J) `( S/ y. L5 S' d# B8 M
求版主详细普及一下，谢谢

作者: zpzp0312 时间: 2012-2-6 08:58

不是国内大师发文章说是胎盘的问题吗？

作者: ambassador 时间: 2012-2-7 04:08

Tlexander 发表于 2012-2-3 14:47 2 k' j4 |/ C0 {+ B+ m' Q0 m1 p
而在普通胚胎中，这一时期的异常率约为30%。???6 a: ]$ J$ ^, a
什么意思？* x7 ]9 a, p; y4 ^! {% n; F4 {
难道老鼠的不育率至少有有30%

就是说如果一只母鼠一次有20个受精卵，只有14个出生，这一时期的异常率就为30%。
4 n/ N8 ?) c7 M7 l& t. A* {
有原文献不？想看看细节，到底是什么因素导致了染色体异常分配：分子基础是什么？是不是细胞质里的细胞器发育的问题，导致微管微丝（骨架系统）异常？

作者: chenmenghua999 时间: 2012-2-7 11:39

提示: 作者被禁止或删除内容自动屏蔽

作者: 食毕莫饥 时间: 2012-2-7 12:54

回复 zpzp0312 的帖子
6 y: ^+ w+ ^9 C0 Z" ?/ A
可能有一个什么原因导致染色体分离异常的同时TE也异常，关键是什么关键因素引发的，再看看那篇文章

作者: zpzp0312 时间: 2012-2-7 13:51

回复食毕莫饥的帖子

它说，为什么克隆胚胎能分离出正常的胚胎干细胞，但却难于产生个体。
最后它用4n补偿就产生了新生儿9 g- a8 w" r$ w( f
所以他证明克隆动物不能发育到足孕是胎盘的问题$ q* d' `2 i+ }" A6 `. j
好像是zhouqi或者谁，反正是国内有名的人，发的国际有名的文章

作者: songzxj 时间: 2012-2-7 16:10

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作者: houliming 时间: 2012-2-8 10:56

本帖最后由 houliming 于 2012-2-8 11:03 编辑 g, U h, n& \5 B" L! `
# F9 o' j3 u r4 l9 u, x* R2 y# [
日本在这方面研究总是很前言，好好学习一下人家的思路，之前只是说：Aberrant epigenetic nuclear reprogramming results in low somatic cloning efficiency.从染色体角度分析还是很有新意！

作者: 食毕莫饥 时间: 2012-2-10 15:18

回复 zpzp0312 的帖子3 T3 r( L7 P$ b$ ?# ~3 |) A

李劲松做的

作者: ambassador 时间: 2012-2-16 00:05

songzxj 发表于 2012-2-7 16:10

还有supplementary呢？？谢谢

作者: songzxj 时间: 2012-2-17 09:15

本帖最后由细胞海洋于 2012-2-18 01:24 编辑 / g6 |3 A) ^/ s
7 z3 ]: f0 A5 E1 X
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作者: ambassador 时间: 2012-2-18 10:53

食毕莫饥发表于 2012-2-10 15:18
" b7 L, D* V* d, f1 \7 ?! E# B$ M/ x回复 zpzp0312 的帖子
1 T9 e; J* |3 K& N
G- w) c$ }4 K' H7 I A* \( |0 g李劲松做的

1 S5 Z# C D( U$ A: a* S
有李老师关于胎盘问题的文献不？

作者: 食毕莫饥 时间: 2012-2-18 11:59

回复 ambassador 的帖子( r. b4 ?: i$ |! }

http://www.stemcell8.cn/thread-37808-1-1.html* k, X0 f" {! o" N/ }4 }
在这

作者: ambassador 时间: 2012-2-18 16:43

食毕莫饥发表于 2012-2-18 11:59
3 p/ e7 A: A* S回复 ambassador 的帖子8 A. |% h$ z3 r, h7 U

: x: F& p, e) P, l" W$ p; H5 ?http://www.stemcell8.cn/thread-37808-1-1.html

谢谢！发现去年看过这篇文章，这记性！

作者: xiaomingxu 时间: 2012-3-31 10:56

核移植胚胎染色体异常率明显高于IVF胚胎和正常体内受精胚胎，日本实验室通过time-lapes实时监测小鼠NT胚胎发育过程，发现了NT胚胎存在不正常的染色体分离这一现象，在人类NT胚胎中也确实存在这一现象。

作者: sjm1203 时间: 2012-4-11 15:12

这个说法好可以看一下吧

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