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标题: IPS分化严重 [打印本页]

作者: sarah19860420    时间: 2012-4-5 23:16     标题: IPS分化严重

为什么IPS在传一代后突然全都分化了呢?没有任何条件改变
作者: panyanfei    时间: 2012-4-6 09:33

能说详细点不?另有图片吗
作者: genedu    时间: 2012-4-6 15:01

培养基有没有配错啊,酶消化的时间是不是过长啊,培养箱中间是不是断过气啊... ...% e6 C' _5 q+ @: z  g
如果是刚刚挑出的克隆,再传第二代的时候,很多都有分化现象,当然您还没有说你的是什么iPS,小鼠的分化现象不是很严重,其他物种的... ...
8 O3 ^- t& f" B% [还有您用的是什么培养体系啊,mES,2i... ...
作者: 牙牙丫丫123    时间: 2012-4-6 22:01

建议你把图片附上,而且把情况描述的详细点~什么培养基、多少代、是一直培养还是复苏培养等?
作者: sarah19860420    时间: 2012-4-9 21:34

回复 牙牙丫丫123 的帖子. T: U0 g% h, m" F! b

( g* Z' ]- z1 w( p. x我养的是人的IPS,IMR90,在26代复苏后一直在培养。但是其他条件都没变。在传代的28代时就发现有一些分化的克隆,接下来就传代基本就属于全分化的状态。传到30代时,克隆贴壁 也比较少。即使贴了,也是分化的。细胞室的显微镜是没有相机的。所以不能照相,5555但是分化状态和之前群上传的分化细胞状态差不多。28代时大多都是在中心开始分化的。
作者: sarah19860420    时间: 2012-4-9 21:34

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我养的是人的IPS,IMR90,在26代复苏后一直在培养。但是其他条件都没变。在传代的28代时就发现有一些分化的克隆,接下来就传代基本就属于全分化的状态。传到30代时,克隆贴壁 也比较少。即使贴了,也是分化的。细胞室的显微镜是没有相机的。所以不能照相,5555但是分化状态和之前群上传的分化细胞状态差不多。28代时大多都是在中心开始分化的。
作者: sarah19860420    时间: 2012-4-9 21:35

回复 panyanfei 的帖子& r1 Z" x8 I4 P7 r5 N5 W* D, ]
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我养的是人的IPS,IMR90,在26代复苏后一直在培养。但是其他条件都没变。在传代的28代时就发现有一些分化的克隆,接下来就传代基本就属于全分化的状态。传到30代时,克隆贴壁 也比较少。即使贴了,也是分化的。细胞室的显微镜是没有相机的。所以不能照相,5555但是分化状态和之前群上传的分化细胞状态差不多。28代时大多都是在中心开始分化的。
作者: jj.jianjia    时间: 2012-4-17 12:08

是不是传代的时间太晚了?你是不是在feeder上长的?我在feeder上长的也一直分化的比较多。matrigel上长的就好多了。只要克隆不长过头,就没问题。
作者: sarah19860420    时间: 2012-4-18 02:43

回复 jj.jianjia 的帖子" m3 j# L: m' b6 f1 G7 u( J

' @' @( N: y% N8 W" v: b可能吧,反正现在我已经放弃了。╮(╯▽╰)╭,谢谢
作者: wangxiang    时间: 2016-7-22 12:57

回复 LSCC 的帖子
* t- }. Y* i' k# |1 N7 Y8 X5 {
5 |2 j0 W1 N' C: z. T$ r我的iPS细胞大概也是15代左右,然后也是传代后容易分化。
作者: wangxiang    时间: 2016-7-25 09:04

回复 LSCC 的帖子
0 ^* ?3 _4 g% l  Q7 s) ?, L0 N8 e3 k- }# o7 y0 E8 w8 `  z
尿液来源的iPS,正常人的
作者: sunluvian    时间: 2017-7-19 15:55

我养的IPS 分化很多,传代后不贴壁生长。




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