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标题: N2B27培养基 [打印本页]

作者: mayiwaiwai    时间: 2012-9-19 09:33     标题: N2B27培养基

请问各位大侠,这个培养基有固定的配方吗,看文献用的都不太一样,是不是加了N2和B27的培养基都叫这个名字呢?
作者: genedu    时间: 2012-9-19 12:57

回复 mayiwaiwai 的帖子) u9 W3 K# q; t9 c
/ \+ b% {  a' c9 l: C9 W
建议您看看应启龙的那篇ground state文献
作者: wbj1983    时间: 2012-10-22 12:11

回复 mayiwaiwai 的帖子
: @/ N$ _5 s* Z/ e3 O
; X1 Y6 S0 H& i# v基础培养基(DMEM/F12或neurobasal)+N2B27+LIF+2i+β-巯基乙醇+Glutamax+双抗,这个培养基我们实验室通常叫做N2B27培养基。这个培养基是适合用feeder free ES 细胞培养,不知道您是用来培养什么细胞的,不同的细胞培养基成分都有所不同的,希望我的建议对您的实验有所帮助!
作者: hjd8886    时间: 2012-10-29 11:52

我们实验室是:NeuroBasal+1%N2与F12+2%B27等体积混匀
作者: mayiwaiwai    时间: 2012-10-29 12:29

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5 O/ S7 ^7 u" R  c5 C4 u' ~谢谢你的回复,养的是R1细胞,也是想用feeder free 养的,用DMEM+FBS+LIF+2i+β-巯基乙醇+Glutamax+NEAA的组合来做,
作者: mayiwaiwai    时间: 2012-10-29 15:57

回复 wbj1983 的帖子# H& |* |) `( r& ]

  g9 e1 Z0 `: ?/ a8 ~, `1 S想问一下同学你的2i是怎么稀释的,所用的DMSO有什么要求么,比如说DMSO是不是需要过滤啊,可是加的这么少,新手,求指点
作者: mayiwaiwai    时间: 2012-10-31 12:37

回复 mayiwaiwai 的帖子. {# B( ?( c$ h* I6 K

4 V8 W7 _! ?3 U; s: Y" j自己回复一下,CHIR99021稀释用DMSO处理,用冻存细胞的DMSO就可以,没有特别的处理,稀释后分装就可以啦
作者: wbj1983    时间: 2012-11-1 13:42

回复 mayiwaiwai 的帖子
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6 a4 D; X) ^) d! p8 a) ]DMSO: SIGMA D2650,不需要过滤,现配成stock,用时按工作浓度需要加到培养中就可以,希望对你有帮助!
作者: xiaocell    时间: 2012-11-1 16:28

我们还加了BSA和insulin
作者: mg1551    时间: 2015-2-2 11:31

好吧
作者: chenkang91    时间: 2016-2-24 23:52

回复 wbj1983 的帖子8 ?/ [, E% k- u1 Y
! j# I0 e2 M$ h* H2 o: u
您好,我正在准备做ES向PGC方向分化的有关实验,其中涉及到N2B27培养基的配方。我想向您请教的是,您那有没有成熟完备的ES无feeder培养方法?




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